[发明专利]一种Azaphilone类衍生物及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，具体的说是一种由团青霉Penicillium commune分离的Azaphilone类衍生物及其制备和应用。

背景技术

微生物是生物制药的重要来源，从微生物中寻找活性代谢产物是获得新的抗菌药物的一个重要途径。自从弗莱明发明了青霉素(penicillin)以来，从微生物中发现了很多结构新颖而且活性显著的化合物，很多已经成为药物或在临床研究当中。Azaphilone类衍生物具有很好的抗菌活性(Shu-Wei Yang et al.，J.Antibiot.，2006，59，720-723)

发明内容

本发明目的在于，提供一种Azaphi lone类衍生物及其制备和应用。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

Azaphilone类衍生物如式A中1、2、3所示，

Azaphilone类衍生物的制备方法，按如下步骤：

1)将团青霉(Penicillium commune)于PDA培养基以20-35℃培养4-7天作为菌种，待用；

2)将步骤1)所得菌种接种于PDB培养基中，以20-35℃静置发酵培养30-35天；发酵产物过滤得发酵液和菌丝体两部分；发酵液用乙酸乙酯萃取，然后将乙酸乙酯蒸干得提取物I；菌丝体用过量的甲醇浸泡，然后将甲醇蒸干后得菌丝体提取物II；合并上述提取物I和提取物II得总提取物，待用；

3)将步骤2)中所得总提取物用氯仿-甲醇溶解，然后用硅胶柱进行色谱分离，分离时依次采用梯度为体积1∶0至0∶1的石油醚-乙酸乙酯和梯度为20∶1至1∶1的氯仿-甲醇洗脱液洗脱；

4)收集步骤3)中梯度为3∶1至1∶1的石油醚-乙酸乙酯的洗脱组分，将洗脱下的组分采用梯度为3∶1至0∶1的石油醚-乙酸乙酯进行硅胶柱层析，收集梯度为1∶1的石油醚-乙酸乙酯的洗脱组分，洗脱下的组分再采用梯度为0∶1至1∶0的甲醇-水进行C-18反相柱层析，收集梯度为1∶1至2∶3的洗脱组分，将洗脱组分采用体积比为57∶43的甲醇-水进行半制备HPLC制备柱洗脱，即得到如式A所示的1、2、3衍生物合物。

所述PDA培养基成分为：陈海水配制的20％的马铃薯浸出液1000mL，葡萄糖20g，琼脂20g，PH6.5-7.0；所述PDB液体培养基的组成为：陈海水配制的20％的马铃薯浸出液1000mL，葡萄糖20g，蛋白胨5g，酵母膏3g，PH6.5-7.0。

Azaphilone类衍生物的应用：所述式A所示的衍生物具有抑制细菌的作用。所述式A所示的衍生物具有抑制革兰氏阳性菌的作用。

本发明所具有的优点：

1.本发明所涉及的Azaphilone类衍生物(化合物1-3，如结构式A所示)可以作为具有抗细菌作用的新药物成分或先导化合物；

2.本发明所涉及的Azaphilone类衍生物可以利用微生物进行发酵生产，具有操作工艺简单，生产周期短、产品成本低的特点；

3.本发明利用微生物发酵法制备抗真菌化合物对环境无污染。

4.本发明所涉及的Azaphilore类衍生物能够有效抑制多种细菌的生长，采用MIC法抗菌实验发现，它们分别对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)和耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌MRSA(Methicillin resistant Staphylococcus aureus)表现出了较强活性，表明该三个化合物可用作制备抗细菌的药物。

具体实施方式

通过下面给出的具体实施例可进一步了解本发明，但它不是对本发明的限定。

实施例1

Azaphilone类衍生物如式A所示：

式A化合物的制备：

1)将团青霉Penicillium commune QSD-17培养于PDA(potato dextrose agar)培养基中，将培养基配制成平板，然后将保种管斜面上的菌株挑入平板，28℃培养4-7天，作为下一步培养的菌种，待用；所述PDA培养基组成为：陈海水配制的20％的马铃薯浸出液1000mL，葡萄糖20g，琼脂20g，PH6.5-7.0。陈海水配制的20％的马铃薯浸出液为每200g马铃薯加入1000mL海水；陈海水为自然海水经沉降、过滤而得。