[发明专利]用于分离纯化的RNA的试剂和方法

权利要求书

1.一种用于从生物学样品分离纯化的RNA的含酚单相组合物，该组合物包括当加入所述生物学样品时终浓度范围从约10％重量/重量至约60％重量/重量的酚以及足以维持所述生物学样品的pH范围在3.6至低于4.0的缓冲剂。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述缓冲剂选自醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸盐、酒石酸盐、乳酸盐或它们的混合物中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物还包括至少一种核糖核酸酶抑制剂。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物还包括酚的衍生物，所述酚的衍生物选自苯基乙醇、丙烯苯氧基醇、百里酚、丁基酚或它们的混合物中的至少一种，所述酚的衍生物终浓度上限为5％重量/重量。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物还包括酚的增溶剂，所述酚的增溶剂选自多元醇、一元醇和胍盐中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物还包括浓度范围从1％重量/重量至5％重量/重量的至少一种有机化合物，其足以增加所述组合物的密度。

7.权利要求1所述的组合物，还包括去污剂。

8.权利要求1所述的组合物，还包括无机盐或有机盐以及螯合剂。

9.一种用于分离纯化的RNA的不含酚的水性组合物，所述不含酚的水性组合物包括至少一种核糖核酸酶抑制剂以及选自醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸盐、酒石酸盐、乳酸盐或它们的混合物中的至少一种缓冲剂，所述缓冲剂足以维持组合物的pH范围在3.6至低于4.0。

10.权利要求9所述的组合物，还包括去污剂。

11.权利要求9所述的组合物，还包括无机盐或有机盐以及螯合剂。

12.一种从生物学样品中分离纯化的RNA的方法，该方法包括：

a)用包括终浓度范围从10％重量/重量至60％重量/重量的酚以及至少一种核糖核酸酶抑制剂的试剂处理样品，

b)将样品与至少一种疏水溶剂混合，维持pH范围为从3.6至低于4.0，

c)向水相中加入等体积水溶性有机溶剂以沉淀纯化的RNA，从水相回收纯化的RNA，以及

d)洗涤并溶解所述沉淀的RNA。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括选自醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、邻苯二甲酸盐、酒石酸盐、乳酸盐或它们的混合物中的至少一种缓冲剂。

14.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括至少一种核糖核酸酶抑制剂。

15.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括去污剂。

16.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括无机盐或有机盐以及螯合剂。

17.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括酚的衍生物，所述酚的衍生物选自苯基乙醇、丙烯苯氧基醇、百里酚、丁基酚或它们的混合物中的至少一种，所述酚的衍生物终浓度上限为5％重量/重量。

18.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括酚的增溶剂，所述酚的增溶剂选自多元醇、一元醇和胍盐中的至少一种。

19.根据权利要求12所述的方法，其中，(a)中所述试剂还包括浓度范围从1％重量/重量至5％重量/重量的至少一种有机化合物，其足以增加所述组合物的密度。

20.根据权利要求12所述的方法，其中，在步骤(a)前，所述样品首先用权利要求9所述的不含酚的组合物进行处理。

21.根据权利要求12或18的方法，其中，(a)中所述试剂是缓冲的，以维持pH范围为从3.6至低于4.0。

22.根据权利要求12或20的方法，其中，所述步骤(a)在从3.9至9.0的pH范围进行，并且然后将所述样品pH范围调节为3.6至低于4.0。