[发明专利]一种复合生防制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种复合生防制剂，其特征在于主要活性组分包括臭椿植物组织提取液、夹竹桃植物组织提取液以及哈茨木霉(Trichodermaharzianum)复合菌种MDCGTH 18的发酵培养物。

2.如权利要求1所述的复合生防制剂，其特征在于所述哈茨木霉(Trichoderma harzianum)复合菌种MDCGTH 18已在中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏日期为2009年3月19号，保藏编号为CGMCCNO.2965。

3.如权利要求1所述的复合生防制剂，其特征在于所述主要活性组分的重量用量比例为：

臭椿提取液∶夹竹桃提取液∶哈茨木霉MDCGTH 18发酵培养物＝(1～2)∶(1～2)∶(1～2)。

4.如权利要求1所述的复合生防制剂，其特征在于所述主要活性组分的优选重量用量比例为：

臭椿提取液∶夹竹桃提取液∶哈茨木霉MDCGTH 18发酵培养物＝1∶2∶1。

5.如权利要求1所述的复合生防制剂的制备方法，其特征在于将臭椿提取液、夹竹桃提取液和哈茨木霉MDCGTH 18液体发酵培养物或固体发酵培养物，按重量比例(1～2)∶(1～2)∶(1～2)，进行混合复配，作为主要杀菌抗菌活性组分；加工为不同剂型的复合生防制剂。

6.如权利要求1或5所述的复合生防制剂的制备方法，其特征在于所说的臭椿提取液的制备方法如下：

①臭椿采集：于四月份分别收集选取无虫害、无菌感染、无腐烂的臭椿的叶、皮，洗去浮尘，晾干备用。

②烘干：将采集到的臭椿叶、皮原料分别置于干燥箱，50℃烘干24h

③粉碎：将烘干后的臭椿叶、皮按(50～80)∶(20～50)重量比例混合，用破碎机粉碎，过20目分样筛，

④提取：以95％乙醇为提取剂，按每100L乙醇处理6kg干燥臭椿粉的配料比例，将臭椿叶、皮混合粉末投入预热至50℃的提取剂乙醇中，搅拌均匀并自然冷却至25℃，然后在300r/min搅拌下，浸泡提取24小时。

⑤过滤：过滤除去固体残渣，所得提取液用于复配。

7.如权利要求1或5所述的复合生防制剂的制备方法，其特征在于所说的夹竹桃提取液制备方法如下：

①夹竹桃采集：分别收集选取无虫害、无菌感染、无腐烂的夹竹桃的花、叶、皮，洗去浮尘，晾干备用。

②烘干：将采集到的夹竹桃的花、叶、皮分别置于干燥箱，于50℃烘干24h。

③粉碎：将烘干后的夹竹桃的花、叶、皮按(40～50)∶(30～40)∶(20～30)重量比例混合，用破碎机粉碎，过20目分样筛。

④提取：以95％乙醇为提取剂，按每100L乙醇处理6kg干燥夹竹桃粉的配料比例，将夹竹桃的花、叶、皮混合粉末投入预热至50℃的提取剂乙醇中，搅拌均匀并自然冷却至25℃，然后在300r/min搅拌下，浸泡提取24小时。

⑤过滤：过滤除去固体残渣，所得提取液用于复配。

8.如权利要求1或5所述的复合生防制剂的制备方法，其特征在于所说的哈茨木霉MDCGTH 18发酵培养物的制备方法如下：

①斜面培养：采用固体PDA培养基，将哈茨木霉MDCGTH 18返回菌种接种在试管培养基上，28℃培养2～3天。

②茄瓶培养：采用液体PD培养基，将试管菌种接种在茄瓶液体培养基中，置于摇床上28℃振荡培养3～4天。

③液体菌种培养物：采用种子培养基，玉米粉2％，葡萄糖0.5％，豆饼粉1％，磷酸氢二钾0.2％，磷酸二氢钾0.3％，碳酸钙1％，pH 6.0，在121℃灭菌40min，将1～2个茄瓶的种子用无菌水洗下，接种于150立升的种子罐内，30℃培养，通气量1∶0.6～0.8，搅拌速度为200r/min，培养时间为36～48h。

④固体菌种培养物：采用固体培养基，麸皮∶稻壳∶玉米粉＝7∶1∶2，含水量为70％，pH6.0，121℃灭菌40min后，以循环水冷却，在接种器内将液体菌种与固体培养基混合均匀，接种量为5～10％，接种完毕转移到固体培养室内培养，30℃培养，培养时间为5～7天，最终产品菌体密度为10⁸～10⁹个/g。

9.如权利要求1所述的复合生防制剂的应用，其特征在可用于防治水稻根线虫、纹枯病、晚疫病、蔬菜灰霉病、蕃茄病毒病、黄瓜白粉病、靶斑病、大姜姜瘟病、西瓜枯萎病、烟草青枯病、小麦赤霉病、全蚀病、根腐病、棉花枯萎病、苹果轮纹病、苦痘病、桃树根癌病、柑橘黄龙病、石榴枯萎病、山杨根腐病。