[发明专利]一种复合生防制剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域：

本发明属生物技术领域，涉及生防制剂-植物提取液与生物菌复合的生防制剂及其制备方法和在防治植物病害方面的应用。

技术背景：

在世界范围内，植物病害普遍地给农业生产造成严重的损失。现以水稻根线虫(Hirschmannielaspp.)为例，根线虫是水稻的重要寄生线虫病害，主要侵染稻根，直接影响水稻分蘖，据估计全世界有58％的水稻田遭潜根线虫的严重侵害，产量损失达25％，重者达40％。目前，化学防治仍是植物寄生线虫病害最主要的防治措施，但诸如氯化苦、溴甲烷、克百威、克线磷、灭多威等传统化学杀线剂的使用成本高，环境相容性较差。随着绿色消费观念的形成和迅速普及，迫切需要开发出安全、高效、低毒的新型生物合理杀线虫剂。这类植物病害在目前生产上主要以化学防治为主，不仅药剂难以长期持续有效，还严重污染环境。农作物施用农药后，极大影响品质，且严重危害人体健康，导致人畜中毒等后果。随着人类环保意识的加强，大力发展绿色农业已经成为新的时代要求，生物防治作为绿色农业的内容越来越受到人们的关注。在植物病害生物防治领域中，微生物所发挥的作用越来越大，微生物农药的研究逐步成为生物防治的支柱产业。

目前，植物病害的生防菌多，是从土壤、根际或植物体表分离的真菌和细菌，但其所处的生态环境因受到外界的紫外线、暴风雨和化学物质等恶劣环境因素的影响，致使其定殖力差，往往在实验室中有一定的防治效果，而在大田生产实际中往往会出现防效不稳定。加之由于生物防治菌对化学杀菌剂普遍敏感，且其效期短，对多数疫病难以起到防治作用，严重限制了其应用范围。因此，增加生物防治菌的抗化学杀菌剂的能力、扩大对病菌的防治范围，成为当前急需解决的技术难题。

发明内容：

本发明着眼点在于选用对多种植物病原菌有抑菌活性并且可使作物增产的植物，对其组织液进行提取，再与自筛菌种复配，制成一种复合生防制剂，使其能够防治多种病害，且又具有增产作用，在多效性及广谱性上优于现有的微生物制剂。

本发明的目的是提供一种广谱抗病促生长的植物提取液、生物菌复合生防制剂。本发明人以植物生态学原理为基础，从具有抗菌作用的臭椿(Ailanthus altissima)、夹竹桃(Amsonia tabernaemontana)等植物组织中，提取具有防治植物病害作用的组织提取液，经与生物菌复配后，进行抑菌能力测试等试验，经过大量实验筛选，确定了抑菌能力强、抑菌谱宽的复配方案，最终得到本发明臭椿提取液复合生防制剂。经过实验室、盆栽和大田实验对比，证明本发明复合生物制剂可以直接对病原菌产生拮抗作用和诱导作物产生抗病作用，同时具有防治线虫病效果，克服了目前一些生防药物防治效果单一的问题。另外，本发明的定殖性好、受环境影响小，能与植物长期共存，作用稳定持久。实验同时表明，本发明复合生防制剂，在防治多种植物病害的同时，对植物生长具有显著促进作用，使综合防治与作物增产的目的实现成为可能。

本发明人经过大量实验研究，创新了制备臭椿植物组织提取液关键技术，并利用自筛菌种进行复配，成功地研制出制出含有臭椿提取液的复合生防制剂，收到非常好的防病抗病和杀线虫效果，经过盆栽试验、大田试验及相关对比试验证明，本发明复合生防制剂在农作物、果树、蔬菜等植物方面具有广谱抗菌、防病治病效果。

本发明所述的含有臭椿提取液的复合生防制剂，其主要活性组分包括臭椿植物组织提取液、夹竹桃植物组织提取液以及自筛哈茨木霉(Trichoderma harzianum)复合菌种MDCGTH 18的发酵培养物。

其中，哈茨木霉复合菌种MDCGTH 18已在中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)进行保藏，地址为北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所，保藏日期为2009年3月19号，保藏编号为CGMCCNO.2965。

上述复合生物制剂中，各活性组分的重量用量比例为：

臭椿提取液∶夹竹桃提取液∶哈茨木霉复合菌发酵培养物

＝(1～2)∶(1～2)∶(1～2)。

依据药效和经济成本多方综合考虑，各活性组分的优选用量比例为：1∶2∶1。

上述臭椿植物组织提取液是采集臭椿叶、皮为原料，经烘干、粉碎后，用乙醇提取制得。

上述夹竹桃植物组织提取液是采集夹竹桃花、叶、皮为原料，经烘干、粉碎后，用乙醇提取制得。

上述哈茨木霉复合菌发酵培养物是用哈茨木霉(Trichodermaharzianum)复合菌种MDCGTH 18，经培养发酵制得。

本发明所述复合生防制剂的具体制备步骤如下：