[发明专利]鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条

权利要求书

1.一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条，其特征在于：试纸条由样品垫（1）、结合垫（2）、硝酸纤维素膜（3）、吸收垫（4）依次粘附在不吸水的支撑薄片（5）上；其中结合垫（2）上包被有胶体金标记的抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8；硝酸纤维素膜（3）上分别包被有抗鹅副粘病毒单克隆抗体3E9构成的检测线T线（6）和兔抗Balb/c小鼠免疫球蛋白抗体IgG构成的质控线C线（7）。

2.根据权利要求1所述的一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条，其特征在于所述的结合垫（2）上包被的胶体金标记的抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8的制备方法如下：

（A）选用抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8标记胶体金，制备金标抗体，用0.1M碳酸钾调胶体金的PH值至8.2，按100ug抗体/毫升胶体金加入抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8,磁力搅拌器混匀30分钟，加BSA至终浓度为1%，静置1小时。4℃ 13000rpm离心30分钟，弃上清，沉淀用标记洗涤保存液洗涤两次，用十分之一初始胶体金体积的洗涤保存液重悬沉淀，4℃备用。

（B）将结合垫浸泡于封闭液即2% BSA、0.5%吐温-20、2.5%蔗糖、0.05%叠氮钠、0.01M PBS中30分钟，37℃烘干；然后将制备好的金标抗体均匀喷涂于结合垫上，每毫升铺20平方厘米，冻干、保存。

3.根据权利要求1所述的一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条，其特征在于所述的硝酸纤维素膜（3）上包被有抗鹅副粘病毒单克隆抗体3E9构成的检测线T线（6）是选用另外一种单抗作为捕获抗体喷涂于检测线上，用包被缓冲液将抗鹅副粘病毒单克隆抗体3E9稀释到50-100ug/ml，调整机器划线为T线，即为检测线靠近结合垫，距结合垫端约5mm。

4.根据权利要求1所述的一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条，其特征在于所述的兔抗Balb/c小鼠免疫球蛋白抗体IgG构成的质控线C线（7）是以Balb/c小鼠免疫球蛋白作为抗原，免疫家兔，提取免疫兔血清中的抗体球蛋白制成，用包被缓冲液将兔抗Balb/c小鼠抗体稀释到50-100ug/ml，调整机器划线为C线，即为对照线靠近吸收垫，距吸收垫端约3mm；两线距离5-8mm，在硝酸纤维素膜NC膜上的质控线上，可与金标抗体结合，以此检验试纸条的有效性。

5.一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条，其特征在于所述的试纸条的检测方法是样品中鹅副粘病毒先和胶体金标记的鼠抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8结合，由于毛细管作用，反应复合物沿包被膜向前泳动，若样品中有鹅副粘病毒，到达检测线时遇到包被在硝酸纤维素膜上的鼠抗鹅副粘病毒单克隆抗体3E9，就会形成金标单抗-鹅副粘病毒-单抗复合物，从而凝集在检测线上，形成特异性的红色沉淀线。没有和鹅副粘病毒结合金标单克隆抗体则会直接通过检测线，富集在质控线上形成红色沉淀线，即判为阳性结果。若样品中无鹅副粘病毒，反应复合物到达检测线时遇到捕获抗体就不会形成捕获单抗-鹅副粘病毒-金标单抗复合物，反应复合物通过检测线，富集在质控线上，形成红色沉淀，即判为阴性结果。