[发明专利]一种从金银花中同时制备绿原酸和木犀草苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于生化物品制备领域，涉及一种从金银花中同时制备绿原酸和木犀草苷的方法。

背景技术

金银花（Chinese honeysuckle，Flos Lonicerae）为忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬属（Lonicera）植物忍冬（Lonicera. japonica Thunb.）的干燥花蕾，为常用中药，具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能，是一种药食同源的绿色天然产物。

金银花主要成分为有机酸类、黄酮类、挥发油、三萜苷类、环烯醚萜苷类、神经酰胺类化合物等。其中，绿原酸是一种极性有机酸，易溶于水、乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂中，木犀草苷是黄酮苷类化合物，溶于水、甲醇、乙醇中。

绿原酸和木犀草苷具有显著的生理活性：绿原酸对消化系统、血液系统和生殖系统疾病均有治疗作用，其明显的抗菌作用有利于急性咽喉炎症及皮肤病的治疗（张鞍灵等，中草药，2001，32(2)：173～174）；此外绿原酸还具有止血，增强白血球及抗病毒作用，能缩短血凝及出血时间（Jaclyn M L等，Mol Cell Biochem,2001，226：89--95）。木犀草苷也具有一定的的药理活性，已有研究表明：木犀草素及其苷具有抗诱变、抗肿瘤、抗感染、抗过敏等药理活性，并被认为是羟基的自由基清除剂及蛋白激酶C的抑制剂，木犀草苷（木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷）具有明显的抗氧化损伤的能力，修复心肌细胞损伤（Cimanga等，Journal of Ethnopharmacology 2006，107(1)：83-90）。最近研究表明，木犀草素通过诱导细胞凋亡抑制恶性肿瘤细胞（Ko WG等，Phytother Res，2002，16：295 - 298），并且木犀草苷比木犀草素对K562细胞增殖表现出更强的抑制作用（韩宁宁等，上海师范大学学报(自然科学版)，2008，(6)：622～626），它对MT-4细胞系具有中等强度的细胞毒作用（应景艳等，药学学报，2008，(4)：335～342）。由于这类物质具有很广泛的生物活性，所以在科学研究和临床上的需求量很大。

现阶段，有关金银花中绿原酸提取研究很多。关于如何从金银花中同时提取主要成分绿原酸和木犀草苷的报道几乎没有，这在很大程度上制约了这种传统药物的进一步发展。

林缎嫦等人（中成药，1994，16(7)：2～4）采用70%乙醇从金银花中提取了绿原酸，绿原酸得率为6.1%。孙志勇等人（中医中药，2004，25(6)：57～58）采用乙醇热回流法从金银花中提取绿原酸，正交实验研究表明，各因素的影响大小依次为：提取次数＞提取时间＞料液比＞乙醇浓度。白海波等人（中国现代应用药学杂志，2003，20(2)：130～132）同样采用了正交实验法优化了乙醇热回流提取绿原酸的最佳工艺，70%乙醇、85℃、提取2次，每次1h。

如果利用传统的方法（聚酰胺前处理结合sephadex LH-20凝胶色谱纯化方法以及制备型高效逆流色谱（HSCCC）方法）从金银花中对绿原酸进行分离纯化，虽然可以得到纯度较高的绿原酸，但是这类方法往往存在着分离步骤繁琐、工艺复杂、设备成本过高等不足，因此，该方法很难用于工业化生产中。同时，有关木犀草苷的制备研究尚未见研究报道，木犀草苷为黄酮苷类化合物，分离制备黄酮苷类化合物的常用方法一般为碱提酸沉，而金银花中木犀草苷的含量一般在0.1%左右，显然不适宜用常规的碱提酸沉法。

所以，研究设计出一种能够简单的大量分离纯化绿原酸和木犀草苷的工艺，是十分重要的，可以有效的利用植物资源，为开发与利用这两种有着良好生物活性的天然产物提供更好的基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从金银花中同时制备绿原酸和木犀草苷的方法，该方法工艺简单，所得化合物纯度较高。

为了实现上述任务，本发明的通过以下技术方案得以实现：

一种从金银花中同时制备绿原酸和木犀草苷的方法，其特征在于，依次按以下步骤进行：

（1）将金银花风干粉碎；在40~60℃下用质量分数为55%~70%的乙醇加热提取3次，每次30min；合并提取液，过滤，减压回收乙醇，得到含有绿原酸和木犀草苷的浸膏；