[发明专利]一种毛细管整体柱及在固定化胰酶中的应用有效
申请号: | 201010522957.4 | 申请日: | 2010-10-27 |
公开(公告)号: | CN102453706A | 公开(公告)日: | 2012-05-16 |
发明(设计)人: | 张丽华;吴帅宾;王婷婷;梁振;张维冰;张玉奎 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 毛细管 整体 固定 化胰酶 中的 应用 | ||
1.一种毛细管整体柱,其特征在于:采用丙烯酰胺和N,N-双甲基丙烯酰胺两种功能单体,通过热聚合在刻蚀处理过的石英毛细管内通过原位共聚合制备成具有特定孔径范围的具有亲水表面的整体材料,整体材料孔表面经过转酰胺化处理后,得毛细管整体柱,其可以连接上胰蛋白酶,并作为微酶反应器使用。
2.根据权利要求1所述的毛细管整体柱,其特征在于:具体制备过程如下,
(1)预聚溶液的配置:20-40mg丙烯酰胺,20-60mg N,N-双甲基丙烯酰胺,100-400mg 1,4-丁二醇,100-500mg二甲基亚砜,100-250mg十二醇和0.5-3mg偶氮二异丁腈;
(2)整体材料的制备:
将预聚溶液超声后,通氮气去除溶液中的溶解氧;导入经过氢氟酸刻蚀的毛细管内,封口,并在60℃下,引发聚合,聚合时间2小时后用纯乙腈或甲醇和纯水分别冲出致孔剂;
(3)整体材料的修饰:
首先通过转酰胺化反应将惰性的酰胺键活化:将整体柱内充满98%的乙二胺,90℃反应3小时,最后用纯水和50mM碳酸氢铵缓冲液将剩余的乙二胺从整体柱内冲洗干净;
其次,在活化后的整体柱内通入25%戊二醛,在室温下反应6小时,随后用纯水和50mM碳酸氢铵缓冲液将剩余的乙二胺从整体柱内冲洗干净;得毛细管整体柱。
3.根据权利要求2所述的毛细管整体柱,其特征在于:功能单体丙烯酰胺与N,N-双甲基丙烯酰胺的质量比为1∶1;
为了完成反应,也需要加入占预聚溶液的总质量90%的制孔剂和占单体溶液的总质量约1%的引发剂。
4.根据权利要求1所述的毛细管整体柱,其特征在于:多孔材料的孔径为100nm~1000nm。
5.一种权利要求1所述的毛细管整体柱在固定化胰酶中的应用。
6.按照权利要求5所述毛细管整体柱的应用,其特征在于:
胰酶固定过程:在整体柱内持续通入1~2mg/mL的胰酶,50mM苯甲眯和3~5mg/mL腈基硼氰化钠的混合溶液,在4℃下反应24小时,从而实现胰酶的固定化。
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