[发明专利]一种黄牛ADD1基因单核苷酸多态性及其检测方法无效
申请号: | 201010531554.6 | 申请日: | 2010-11-04 |
公开(公告)号: | CN102031304A | 公开(公告)日: | 2011-04-27 |
发明(设计)人: | 陈宏;钱丽娜;张春雷;房兴堂 | 申请(专利权)人: | 徐州师范大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 221116 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄牛 add1 基因 核苷酸 多态性 及其 检测 方法 | ||
1.一种黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性,其特征在于,其基因单核苷酸多态性包括:
在黄牛的ADD1基因第70027位为G或A的碱基多态性;
在黄牛的ADD1基因第70051位为G或A的碱基多态性。
2.权利要求1所述黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
以包含ADD1基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛ADD1基因;所述的引物对P为:
上游引物:5’ATAGTCATCTGACCTGCTTGA3’
下游引物:5’AGCGGTGACCACATTCTTA3’;
PCR扩增完成之后进行琼脂糖凝胶电泳,然后进行PCR产物的切胶回收及纯化、测序;
最后进行PCR-SSCP检测:首先分别用变性剂进行变性处理,然后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果判定其多态性。
3.如权利要求2所述的黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述的PCR扩增的反应程序为:95℃预变性4min;94℃变性45s,58℃退火50s,72℃延伸1min,32个循环,最后72℃延伸10min,4℃保存。
4.如权利要求2所述的黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述聚丙烯酰胺凝胶电泳采用10%的聚丙烯酰胺凝胶。
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