[发明专利]一种黄牛ADD1基因单核苷酸多态性及其检测方法无效
| 申请号： | 201010531554.6 | 申请日： | 2010-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN102031304A | 公开（公告）日： | 2011-04-27 |
| 发明（设计）人： | 陈宏;钱丽娜;张春雷;房兴堂 | 申请（专利权）人： | 徐州师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 221116 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄牛 add1 基因 核苷酸 多态性 及其 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性，其特征在于，其基因单核苷酸多态性包括：
在黄牛的ADD1基因第70027位为G或A的碱基多态性；
在黄牛的ADD1基因第70051位为G或A的碱基多态性。
2.权利要求1所述黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
以包含ADD1基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛ADD1基因；所述的引物对P为：
上游引物：5’ATAGTCATCTGACCTGCTTGA3’
下游引物：5’AGCGGTGACCACATTCTTA3’；
PCR扩增完成之后进行琼脂糖凝胶电泳，然后进行PCR产物的切胶回收及纯化、测序；
最后进行PCR-SSCP检测：首先分别用变性剂进行变性处理，然后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果判定其多态性。
3.如权利要求2所述的黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增的反应程序为：95℃预变性4min；94℃变性45s，58℃退火50s，72℃延伸1min，32个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。
4.如权利要求2所述的黄牛ADD1基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺凝胶电泳采用10％的聚丙烯酰胺凝胶。
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