[发明专利]一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子及其制备方法

权利要求书

1.一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子，其特征在于，它的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子的制备方法，其特征在于，步骤如下：

    1）表达载体的构建：以原核表达载体pQ31为骨架，利用PCR分别扩增两个相同人NKG2D受体的胞外区片段SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3，将这两个片段先后插入pQ31载体，中间接上柔性片段；然后将IL-15的PCR扩增片段SEQ ID NO：4插入pQ31载体，与上述两个胞外区片段形成串联，中间接上柔性片段，得到融合蛋白表达载体；

    2）蛋白的表达及高效复性：将步骤（1）得到的融合蛋白表达载体转化入M15大场杆菌菌株，经IPTG诱导表达，然后洗涤包涵体，变性条件下用 Ni⁺-ITA树脂纯化，进一步复性后得到dsNKg2D-IL-15蛋白。