[发明专利]一种花生体胚诱导及植株再生的方法无效
申请号: | 201010534472.7 | 申请日: | 2010-10-26 |
公开(公告)号: | CN101965798A | 公开(公告)日: | 2011-02-09 |
发明(设计)人: | 王晶珊;赵明霞;王晓杰;乔利仙;隋炯明;郭宝太 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 青岛联智专利商标事务所有限公司 37101 | 代理人: | 崔滨生 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 花生 诱导 植株 再生 方法 | ||
1.一种花生体胚诱导及植株再生的方法,其特征在于包括如下步骤,
(1)制备体胚诱导培养基:选取MSB5为基本培养基,在所述基本培养基中添加2,4-D制成体胚诱导培养基,2,4-D的添加量为每升所述基本培养基中添加5~10mg;
(2)选择外植体材料:将花生种子去子叶后的种胚表面消毒,取胚小叶为外植体材料;
(3)按以下步骤进行体胚诱导及植株再生:
a将花生种子去子叶后的种胚进行表面消毒,然后用无菌水漂洗后,置于装有无菌水的广口瓶中浸泡12~16h;
b取出经表面消毒浸泡好的种胚,置于无菌培养皿中分离种胚的胚小叶,接种到所述诱导培养基中进行诱导培养,25~30d后形成体胚;
c将形成有体胚的外植体转移至体胚萌发培养基上进行萌发培养,每隔25~30d继代一次,继代两次后得到再生苗;所述体胚萌发培养基是由选取MSB5为基本培养基,在所述基本培养基中添加BAP形成,BAP的添加量为每升所述基本培养基中添加4mg;
d当再生苗生长至2~3cm时,从基部切下,转移至生根培养基中诱导生根,获得完整植株;所述生根培养基是由选取1/2MSB5为基本培养基,在所述1/2MSB5基本培养基中添加NAA形成,NAA的添加量为每升所述基本培养基中添加0.2~0.5mg。
2.根据权利要求1所述的花生体胚诱导及植株再生的方法,其特征在于,所述培养基均在培养室温度为24~26℃、光照强度为2500~3500Lx、光照时间为13h/d的培养条件下培养。
3.根据权利要求1所述的花生体胚诱导及植株再生的方法,其特征在于,所述花生种胚的表面消毒采用75%的酒精浸泡15~25s,再用0.1%的升汞浸泡。
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