[发明专利]一种荧光定量PCR反应液及荧光定量PCR方法有效
申请号: | 201010538264.4 | 申请日: | 2010-11-10 |
公开(公告)号: | CN102465120A | 公开(公告)日: | 2012-05-23 |
发明(设计)人: | 张庆辉;陈敏峰;黄业博;陈城超;孙勇;张秀清;杨焕明 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 程泳 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 定量 pcr 反应 方法 | ||
1.一种荧光定量PCR反应液,其特征在于所述反应液中包含二甲亚砜、甘油、牛血清白蛋白、甲酰胺、聚乙二醇6000、亚精胺、硫酸铵和甜菜碱中的一种或多种。
2.权利要求1的反应液,其特征在于所述反应液中包含二甲亚砜、牛血清白蛋白和甜菜碱。
3.权利要求1的反应液,其还包含耐热DNA聚合酶,所述DNA聚合酶具有5′-3′聚合酶活性和5′-3′外切酶活性,优选地,所述DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,更优选为Ex TaqTM DNA聚合酶。
4.权利要求3的反应液,其中所述DNA聚合酶为热启动DNA聚合酶,优选为Ex TaqTM热启动DNA聚合酶。
5.一种荧光定量PCR反应液,其特征在于反应液的成份包含10-67mM pH8.2-9.0Tris-HCl、25-50mM KCl、1.5-5.0mM Mg2+、0.2-0.4mM dNTP、0.05%-0.1%Tween 20、1%-10%二甲亚砜、0.1μg/μl-1μg/μl牛血清白蛋白、0.5-2M甜菜碱和0.04-0.2U/μl热启动DNA聚合酶。
6.权利要求5的反应液,其中所述的Mg2+为2.5-3mM,二甲亚砜为1.2%-5%,牛血清白蛋白为0.1-0.8μg/μl,甜菜碱为1-1.2M,热启动DNA聚合酶为0.05-0.07U/μl。
7.一种荧光定量PCR试剂盒,其包含权利要求1-6任一项所述的反应液。
8.一种荧光定量PCR方法,其特征在于所述方法包含使用权利要求1-6任一项所述的反应液的步骤。
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