[发明专利]一种荧光定量PCR反应液及荧光定量PCR方法有效

专利信息
申请号: 201010538264.4 申请日: 2010-11-10
公开(公告)号: CN102465120A 公开(公告)日: 2012-05-23
发明(设计)人: 张庆辉;陈敏峰;黄业博;陈城超;孙勇;张秀清;杨焕明 申请(专利权)人: 深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 代理人: 程泳
地址: 518083 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 荧光 定量 pcr 反应 方法
【权利要求书】:

1.一种荧光定量PCR反应液,其特征在于所述反应液中包含二甲亚砜、甘油、牛血清白蛋白、甲酰胺、聚乙二醇6000、亚精胺、硫酸铵和甜菜碱中的一种或多种。

2.权利要求1的反应液,其特征在于所述反应液中包含二甲亚砜、牛血清白蛋白和甜菜碱。

3.权利要求1的反应液,其还包含耐热DNA聚合酶,所述DNA聚合酶具有5′-3′聚合酶活性和5′-3′外切酶活性,优选地,所述DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,更优选为Ex TaqTM DNA聚合酶。

4.权利要求3的反应液,其中所述DNA聚合酶为热启动DNA聚合酶,优选为Ex TaqTM热启动DNA聚合酶。

5.一种荧光定量PCR反应液,其特征在于反应液的成份包含10-67mM pH8.2-9.0Tris-HCl、25-50mM KCl、1.5-5.0mM Mg2+、0.2-0.4mM dNTP、0.05%-0.1%Tween 20、1%-10%二甲亚砜、0.1μg/μl-1μg/μl牛血清白蛋白、0.5-2M甜菜碱和0.04-0.2U/μl热启动DNA聚合酶。

6.权利要求5的反应液,其中所述的Mg2+为2.5-3mM,二甲亚砜为1.2%-5%,牛血清白蛋白为0.1-0.8μg/μl,甜菜碱为1-1.2M,热启动DNA聚合酶为0.05-0.07U/μl。

7.一种荧光定量PCR试剂盒,其包含权利要求1-6任一项所述的反应液。

8.一种荧光定量PCR方法,其特征在于所述方法包含使用权利要求1-6任一项所述的反应液的步骤。

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