[发明专利]人体血干细胞分离材料盒

权利要求书

1.一种人体血干细胞分离材料盒，由材料盒盒体、干细胞保护液及离心管组成，其特征在于：所述的材料盒包括A型盒、B型盒，A型材料盒（4）内装有两瓶250ml干细胞保护液（1），盒体的中部设有两支10ml移液管（3），移液管的上下两侧装有二十支15ml离心管（2）及20支15ml一次性医用空离心管（9）。

2.根据权利要求1所述的人体血干细胞分离材料盒，其特征在于：所述的B型材料盒（5）的盒体内装有两瓶250ml干细胞保护液（1），盒体的中部设有两支20ml移液管（7），移液管的上下两外侧装有十支50ml离心管（6）及10支50ml一次性医用空离心管（8）。

3.根据权利要求1所述的人体血干细胞分离材料盒，其特征在于：所述的材料盒还包括分离材料盒的使用方法：

（1）检查外包装完整无破损，用75%酒精消毒后打开外包装，取出离心管，观察密度介质之上是否有游离的分离液，如有分离液，则用离心机分离，离心1分钟，离心机转速为2500转/分；

（2）抗凝全血无需稀释，可直接缓慢加置密度介质之上，分离液不会与血液混合，如此可最大限度减少干细胞的分离时间，保留细胞活力；

（3）20℃以下室温，用离心机离心18分钟，离心机转速为2500转/分；

（4）吸取离心管中间絮状细胞层，移入另一支空无菌离心管中，该管无任何内容物，需提前加入3—6ml干细胞保护液，如此将所有离心管中间细胞层的细胞移至空离心管中，加入干细胞保护液至空离心管的最高刻度；

（5）用离心机离心5分钟，弃上清，沉淀细胞加入干细胞保护液反复清洗3遍；

（6）用干细胞保护液或生理盐水稀释、收集所需细胞，密封，置于4℃冰箱中保鲜。

4.根据权利要求1或3所述的人体血干细胞分离材料盒，其特征在于：所述的材料盒的使用方法还包括干细胞的鉴定方法：

干细胞的鉴定方法：采用单克隆抗体免疫荧光法，用CD29、CD34、CD44、CD45等单克隆抗体，进行免疫荧光鉴定，干细胞纯度在98%以上：

干细胞的安全性检测：按照2005年中国药典三部附录中的ⅦA的方法检测细菌、支原体和真菌，结果为阴性；

干细胞的外源性病毒检测：细胞逆转录病毒检测阴性，不同传代培养细胞检查猴源Vero细胞和人源2BS细胞结果为正常形态，红细胞吸附试验结果阴性；

干细胞内毒素检测：依中华人民共和国药典2005年第三版（附录XⅡC），细胞内毒素含量<2EU/ml。