[发明专利]一种可溶性珠蛋白的制备方法有效
申请号: | 201010543845.7 | 申请日: | 2010-11-15 |
公开(公告)号: | CN102464711A | 公开(公告)日: | 2012-05-23 |
发明(设计)人: | 成国祥;于伟;江国永;潘勇 | 申请(专利权)人: | 上海杰隆生物制品股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 祝莲君;雷芳 |
地址: | 200233 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 可溶性 珠蛋白 制备 方法 | ||
1.一种珠蛋白的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(a)将血球在水中破细胞膜,得到破膜的血红蛋白液体,去除细胞膜,获得去膜的血红蛋白液;
(b)将去膜的血红蛋白液与无机酸混合,使PH为1~4,搅拌,得到血红素与珠蛋白混合液I;
(c)将混合液I与活性炭混合、搅拌,得到混合液II;
(d)将混合液II进行至少一次的微滤,得到透过液;微滤用膜分子量为10±2万单位;
(e)将透过液进行纳滤脱盐,得截留液V;纳滤所用膜分子量为200单位;所述的截留液V即为珠蛋白溶液。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的血球来源于动物。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)中,将血球在水中破细胞膜的方法是:将血球与2-5倍体积的水混合,搅拌处理1-3小时,得到破膜的血红蛋白液体。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)中,通过离心去除细胞膜,所述离心采用碟片式离心机,转速8000-11000转/分钟,细胞膜从下端排渣口排出。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的无机酸选自:柠檬酸、盐酸。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)中,将去膜的血红蛋白液与无机酸在30-40℃搅拌6-12小时,得到血红素与珠蛋白混合液I。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(c)中,将混合液I与活性炭混合,于40-50℃搅拌6-14小时,得到混合液II;
所述活性炭添加量为血球体积的1-8%,即10-80公斤/吨血球。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(d)包括:
(d1)将混合液II进行微滤,得透过液III与截留液;
(d2)用稀的无机酸稀释截留液,使PH为1~4,再次进行微滤,得透过液IV;
(d3)合并透过液III、IV。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)之前,还包括步骤:将抗凝全血进行分离,得到血浆和血球,分离获得其中的血球。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,还包括步骤:
(f)将截留液V进行喷雾干燥,得珠蛋白的固体。
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