[发明专利]一种溶菌酶及其制备和应用

权利要求书

1.一种溶菌酶，其特征在于：溶菌酶为序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列所示。

2.一种权利要求1所述的溶菌酶的制备，其特征在于：

1)质粒pLysG的构建：

以大菱鲆cDNA为模板，用引物F1和R1进行PCR扩增。PCR产物纯化后与载体pBS-T于室温连接2-8小时，连接混合液转化大肠杆菌，筛选转化子提取质粒，即为质粒pBLysG

将上述质粒pBLysG和质粒pPIC9H分别用限制性内切酶EcoRV和SnaBI酶切，回收0.58kb和9.2kb片段，将这二片段用T4DNA连接酶连接，连接液转化入大肠杆菌，筛选转化子提取质粒，即为质粒pLysG；

2)溶菌酶的表达和制备

将上述步骤1)的质粒pLysG转化入酵母GS115内，在含有安卡青霉素的LB培养基上培养，筛选转化子即为GS115/pLysG；

将转化子GS115/pLysG进行诱导表达后，收集上清，将上清用UltraCentrifugal Filter Devices浓缩20-25倍后，浓缩后的上清即为序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列所示的溶菌酶。

3.按权利要求2所述的溶菌酶的制备，其特征在于：所述步骤1)中F1为5’-GATATCATGGGTTATGCAAATATCAAGG-3’；R1为5’-GATATCAAACCCATTCCTTTTGTACCA-3’。

4.一种权利要求1所述的溶菌酶的应用，其特征在于：所述序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列的溶菌酶可作为抑菌剂。

5.按权利要求4所述的溶菌酶的应用，其特征在于：所述溶菌酶可作为革兰氏阳性或革兰氏阴性菌的抑菌剂。

6.按权利要求5所述的溶菌酶的应用，其特征在于：所述溶菌酶可作为哈氏弧菌、海豚链球菌、创伤弧菌或副溶血弧菌的抑菌剂。