[发明专利]一种芽孢杆菌及其酯酶的提取方法和应用无效
申请号: | 201010546319.6 | 申请日: | 2010-11-15 |
公开(公告)号: | CN102134559A | 公开(公告)日: | 2011-07-27 |
发明(设计)人: | 肖桂秋;隆湘蕾 | 申请(专利权)人: | 广州吉家庄生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/16;C12Q1/44;C12R1/08 |
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地址: | 510620 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芽孢 杆菌 及其 提取 方法 应用 | ||
1.一种芽孢杆菌(Bacillus brevis)GDXEase8,其特征在于:其保藏编号为CCTCC M 2010295。
2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌(Bacillus brevis)GDXEase8,其特征在于:所述芽孢杆菌的16SrDNA序列如SEQ ID NO:1所示。
3.一种权利要求1或2的所述的芽孢杆菌酯酶的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)斜面菌种:将芽孢杆菌(Bacillus brevis)GDXEase8接种到营养琼脂斜面上培养;
(2)扩大种子液培养:将斜面菌种接种到装有种子培养基的三角瓶中,37±3℃,100-300rpm,摇床培养12-14小时;
所述种子培养基为蛋白胨1%,酵母膏0.5%,NaCl 0.5%,pH7.0;
(3)发酵培养:将扩大培养种子液接种到发酵培养基中,于37±3℃培养24-26小时;
所述发酵培养基为:葡萄糖1%,蛋白胨2%,K2HPO4 0.1%,NaH2PO4 0.1%,pH7.0;
(4)芽孢杆菌酯酶的提取:将发酵菌液3000-5000rpm离心10-20min,收集菌体,用0.01-003mol/L pH7.0磷酸缓冲液洗涤后再次用磷酸缓冲液悬浮,用超声波破壁法提酶,3000-5000rpm离心10-20min,所得上清即为芽孢杆菌酯酶。
4.如权利要求3所述的芽孢杆菌酯酶在农药残留检测方面的应用。
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