[发明专利]一种雨生红球藻粉及提取物虾青素含量测定方法

权利要求书

1.一种虾青素含量的测定方法，所述方法采用分光光度计和/或高效液相色谱来测定虾青素的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用分光光度计测定虾青素的含量包括以下步骤：

1)将样品溶于丙酮中；

2)于474nm处读取样品溶液吸光值；

3)按下式计算虾青素质量百分比：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用高效液相色谱测定虾青素的含量包括以下步骤：

1)将样品溶于丙酮，并加入胆甾醇酯酶溶液水解，使溶液中的虾青素酯水解为游离虾青素；

2)测定虾青素的色谱条件如下：C18柱，流动相为丙酮、水和乙酸乙酯，流速为1.2mL/min，梯度洗脱条件为0～20分钟(82％丙酮+8％水+10％乙酸乙酯)，20～24分钟(29％丙酮+1％水+70％乙酸乙酯)，24～30分钟(82％丙酮+8％水+10％乙酸乙酯)，检测波长为474nm；

3)按下式计算虾青素含量：

RF-虾青素＝[P(trans-asta)标+1.2P(9-cis)+1.6P(13-cis)]/C标

C样＝[P(trans-asta)样+1.2P(9-cis)+1.6P(13-cis)]/RF-虾青素

其中，RF-虾青素＝虾青素响应因子；C标(μg/mL)为虾青素标准品浓度，该值可由下式计算出(其中92％为虾青素比例系数，V(mL)为总稀释体积)：

C样(μg/mL)为样品中虾青素浓度；P(trans-asta)标为虾青素标准品峰面积(mV.s.)；P(trans-asta)样为样品峰面积(mV.s.)，常数1.2、1.6分别为9-cis(9位顺式虾青素)、13-cis(13位顺式虾青素)在测定条件下与全反式虾青素响应因子差异校正系数。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述虾青素为雨生红球藻、雨生红球藻提取物或雨生红球藻提取物制剂中包含的虾青素。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述雨生红球藻提取物是通过以CO₂为萃取介质的超临界流体萃取方法制备的，具体的萃取条件如下：温度为60～80℃，压力为35～45MPa，CO₂流速为15～25L/h，时间为2～4小时。