[发明专利]一种含有OXT拮抗剂药物的生产工艺

说明书

技术领域：

本发明涉及一种含有OXT拮抗剂药物的生产工艺，尤其涉及阿托西班的一种固相合成法及其冻干粉针剂制剂工艺。

背景技术：

阿托西班是一种催产素类似物，为人工合成的环状多肽，是子宫内及蜕膜、胎膜上受体的催产素竞争性拮抗剂，在临床上使用其醋酸盐治疗早产。阿托西班可剂量相关性地抑制宫缩，并使环状肽催产素介导的前列腺素分泌减少，达到保胎的目的。

早产是围生儿死亡率和发病率的一个最重要原因，不包括致命的先天畸形。它是75％围产期死亡和50％儿童期神经失能的原因。最好的宫缩抑制剂应该是，对母亲和胎儿来说是安全的，能延长妊娠以使有足够的时间显著地降低早产，使胎儿成熟，从而减少围生儿死亡率和发病率。然而，目前宫缩抑制剂不符合这些要求。它们已被证明能显著地延迟分娩长达48小时，有助于肺糖皮质激素诱导成熟，但它们并没有使早产率显著性地降低。此外，他们有常见的副作用，导致母亲和胎儿的发病率和退出率很高，尤其是β-激动剂(第一线药物)。

阿托西班是妇产科药物中的一种突破产品，它是一种特定的催产素受体拮抗剂，用于推迟不足月分娩。在过去的几年，许多临床试验已经评估其疗效和安全性。阿托西班能快速地抑制宫缩，延长妊娠，而对母亲，胎儿和婴儿没有不良影响。因此阿托西班在临床上有很好的应用前景，具有很高的开发价值。

阿托西班的结构如下：

分子式：C₄₃H₆₇N₁₁O₁₂S₂

分子量：994.19

本方法提供了一种产率更高，环境污染更小以及制剂更稳定的生产工艺。

已上市的阿托西班注射液的处方包含有7.5mg/ml阿托西班，50.0mg/ml甘露醇，1mol/L盐酸调pH值至4.5。其稳定性差，只可于冰箱温度2℃～8℃保存。阿托西班冻干粉针剂克服了注射剂存在稳定性差的不足，具有分散度高，稳定性好等优点。该制剂质量稳定，疗效确切，利于患者接受。

发明内容：

本发明的目的在于提供阿托西班的一种固相合成法及一种冻干粉针剂，以克服现有技术上存在的缺陷和注射剂稳定性差的不足。本发明提供了一种高收率、低成本、环境污染小、有利于实现产业化的阿托西班固相合成方法，以及能改善制剂的稳定性、延长有效期、便于室温贮藏的冻干粉针剂。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义：

Fmoc：芴甲氧羰基

TBTU：O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯

HOBt：1-羟基苯骈三唑

DIEA：N，N-二异丙基乙胺

TFA：三氟醋酸

DCM：二氯甲烷

DMF：N，N-二甲基甲酰胺

EDT：乙二硫醇

Water：水

Trt：三苯甲基

Et：乙基

tBu：叔丁基

Boc：叔丁氧羰基

Mpa：巯基丙酸

一种固相合成阿托西班的方法，包括以下步骤：

1)以氨基树脂为载体，脱保护；

2)将Fmoc-Gly-OH的羧基与树脂的氨基相连，得到Fmoc-Gly-氨基树脂；

3)依次固相合成序列剩余保护氨基酸；

4)脱掉半胱氨酸和巯基丙酸的侧链保护基；

5)用碘进行固相环化；

6)切割，得到阿托西班粗肽；

7)精制，得到阿托西班纯品。

本发明提供了一种固相合成阿托西班的方法，其氨基树脂为Rink Amide MBHA树脂，树脂替代度为0.8～1.2mmol/g。其保护氨基酸分别是Fmoc-Gly，Fmoc-Orn(Boc)，Fmoc-Pro，Fmoc-Cys(Trt)，Fmoc-Asn(Trt)，Fmoc-Thr(tBu)，Fmoc-Ile，Fmoc-D-Tyr(Et)，Mpa(Trt)-OH。其缩合试剂为TBTU/HOBt/DIEA。其保护氨基酸以及缩合试剂的投料量是2～5倍当量。其接氨基酸过程中的每一步都经Kaiser Test，颜色呈阴性则依次接保护氨基酸。其脱除半胱氨酸和巯基丙酸的侧链保护基的试剂是1％TFA/DCM。其环化试剂是I₂，溶剂为DMF。其裂解试剂是按TFA∶EDT∶water＝95∶2.5∶2.5的体积比配制而成。其阿托西班纯品是粗肽经反相高效液相色谱法分离纯化而得，其色谱条件为：

色谱柱：Φ15cm

色谱柱填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶(C18)10μm