[发明专利]桔梗多糖及其降解产物,制备方法和用途

权利要求书

1.一种从桔梗根茎中提取分离的桔梗多糖PGA-4-3b，其结构式如下：

α-D-GalpA-(1[→4)-α-D-GalpA-(1]_x→4)-α-D-GalpA

其中x为13至98的整数；其分子量为2.6～18.0kDa；在浓度为0.5mg/ml水溶液中比旋度为+125.6°。

2.根据权利要求1所述桔梗多糖，其特征在于，所述x为28至78的整数，分子量为8.9kDa。

3.根据权利要求1或2所述桔梗多糖，其特征在于，所述x为48。

4.根据权利要求1所述桔梗多糖的降解产物，其特征在于，四个降解产物分别为4-3bde-O-1、4-3bde-O-2、4-3bde-O-3和4-3bde-O-4，这四种降解产物的分子量范围为0.7-3.5kDa，其通过将权利要求1所述的桔梗多糖经稀酸降解，反应液除去酸后，对蒸馏水透析，透析外液浓缩至小体积，用Bio-Gel P-2凝胶过滤柱分离得到所述四个降解产物，其洗脱体积分别对应于多糖，寡糖，三糖和单糖。

5.根据权利要求4所述的桔梗多糖的降解产物，其特征在于，其中组分4-3bde-O-1和组分4-3bde-O-2的分子量范围分别为1.8～3.00kDa和1.4～1.8kDa。

6.一种从桔梗根茎中提取根据权利要求1所述的桔梗多糖的提取方法，步骤如下：

1)水提粗多糖(PGA)的制备：干燥的桔梗饮片，经乙醇脱脂、干燥后，用热水反复提取4～6次，合并提取液；所得提取液浓缩后用15％(w/v)三氯乙酸法脱蛋白，离心分离，所得上清液用10％NaOH中和、对流动水透析、内液减压浓缩浓缩至小体积，加入2～4倍于浓缩液体积的95％的乙醇，离心分离得沉淀，该沉淀经真空干燥，得水提粗多糖PGA；

2)桔梗多糖PGA-4-3b的制备：向上述步骤1)得到的水提粗多糖PGA加入适量水溶解并离心，上清液用二乙基氨乙基纤维素[DEAE-纤维素(Cl-型)]为载体进行柱层析分离，分别以水、0.2、0.4、0.8mol/l NaCl溶液梯度洗脱，其中0.4mol/L NaCl洗脱部分经Sephacryl S-300HR和Bio-Gel P-10凝胶过滤色谱柱层析反复分离纯化，所得产物经透析，冷冻干燥，得到桔梗多糖PGA-4-3b，为黄褐色絮状固体。

7.一种制备权利要求4所述的桔梗多糖的降解产物的方法，其特征在于，按照以下步骤进行：

桔梗多糖置于干燥的圆底烧瓶中，加入三氟乙酸，密塞，100℃保温；反应液在＜40℃下减压蒸发完全除去三氟乙酸，对蒸馏水透析；透析袋内、外液分别浓缩后冻干；两次透析外液减压浓缩，冷冻干燥，产物溶于适量水用Bio-Gel P-2凝胶过滤柱分离，硫酸-苯酚法检测，以标准糖做对照，按照峰位收集组分并冻干，得到四个降解产物组分，分别为4-3bde-O-1、4-3bde-O-2、4-3bde-O-3和4-3bde-O-4。

8.一种药物组合物，其中该药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1至5中任意一项所述的桔梗多糖或其降解产物，以及药学上可接收的辅料。

9.根据权利要求1至5中任意一项所述的桔梗多糖或其降解产物制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的桔梗多糖或其降解产物的应用，其特征在于，所述抗肿瘤药物为抗肿瘤细胞血管生成的疾病的药物。