[发明专利]一种辅助鉴定藜草花叶病毒的试剂及其应用

权利要求书

1.一种辅助鉴定藜草花叶病毒的试剂，包括特异引物；所述特异引物由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA和序列表的序列3所示DNA组成。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于：所述试剂由所述特异引物和特异探针组成；所述特异探针的核苷酸序列如序列表的序列4所示。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于：所述特异探针为TaqMan探针。

4.权利要求1至3中任一所述的试剂在制备辅助鉴定藜草花叶病毒的试剂盒中的应用。

5.一种辅助鉴定藜草花叶病毒的试剂盒，包括权利要求1至3中任一所述的试剂。

6.权利要求1至3中任一所述的试剂在辅助鉴定藜草花叶病毒中的应用。

7.一种辅助鉴定藜草花叶病毒的方法，包括如下步骤：以待测病毒的cDNA为模板，用特异引物对甲进行PCR，得到PCR产物甲；以待测病毒的cDNA为模板，用特异引物对乙进行PCR，得到PCR产物乙；如果PCR产物甲为78bp且PCR产物乙为97bp，待测病毒为候选的藜草花叶病毒；所述特异引物对甲为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成的引物对；所述特异引物对乙为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列3所示DNA组成的引物对。

8.一种辅助鉴定藜草花叶病毒的方法，包括如下步骤：以待测病毒的cDNA为模板，用特异引物对甲和特异探针进行实时荧光PCR，得到扩增曲线甲；以待测病毒的cDNA为模板，用特异引物对乙和所述特异探针进行实时荧光PCR，得到扩增曲线乙；根据扩增曲线甲和扩增曲线乙判断待测病毒是否为候选的藜草花叶病毒；所述特异引物对甲为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成的引物对；所述特异引物对乙为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列3所示DNA组成的引物对；所述特异探针为TaqMan探针，核苷酸序列如序列表的序列4所示。

9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述待测病毒为藜草花叶病毒、番茄黑环病毒、草莓潜环斑病毒、番茄丛矮病毒或桃丛簇花叶病毒。

10.一种检测待测样本中是否含有藜草花叶病毒的方法，包括如下步骤：

(1)提取待测样本的总RNA，反转录为cDNA；

(2)以所述cDNA为模板，用特异引物对甲和特异探针进行实时荧光PCR，得到扩增曲线甲；以所述cDNA为模板，用特异引物对乙和所述特异探针进行实时荧光PCR，得到扩增曲线乙；根据扩增曲线甲和扩增曲线乙判断待测样本中是否含有藜草花叶病毒；所述特异引物对甲为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成的引物对；所述特异引物对乙为序列表的序列1所示DNA和序列表的序列3所示DNA组成的引物对；所述特异探针为TaqMan探针，核苷酸序列如序列表的序列4所示。