[发明专利]一种耐高温植酸酶基因工程菌的发酵方法无效
| 申请号： | 201010563563.3 | 申请日： | 2010-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN101985615A | 公开（公告）日： | 2011-03-16 |
| 发明（设计）人： | 黄魁英;明飞平;夏枫耿;梁淑娃;彭中健;黄乐天;蓝碧锋;缪承杜;赵培静 | 申请（专利权）人： | 广州市微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510663 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 耐高温 植酸酶 基因工程 发酵 方法 | ||
1.一种植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：
（1）植酸酶基因工程菌高密度培养阶段：将植酸酶基因工程菌种子接种于发酵罐中培养，待初始葡萄糖耗尽后，DO值迅速回升时，补充碳源直至高密度培养阶段结束；
（2）诱导表达：用甲醇诱导表达植酸酶后结束发酵；
（3）分离纯化。
2.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中所述碳源为葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中的补料方式为分批补料、恒溶氧流加。
4.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中溶氧维持在20~50%；步骤（2）中的诱导表达溶氧维持在10%。
5.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中所述补充碳源的时间是在发酵16h后。
6.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（2）中所述甲醇的流速为8mL/L/h。
7.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中所述培养时间为48h。
8.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（1）中的培养中，pH值调节在5.5。
9.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（2）中所述诱导表达的时间为72h。
10.根据权利要求1所述的植酸酶基因工程菌的发酵方法，其特征在于步骤（3）中所述分离纯化是：离心得粗酶液，用丙酮沉淀和离子交换层析对粗酶液进行纯化，丙酮浓度为65%，离子交换层析柱pH为5.5。
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