[发明专利]纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法有效
| 申请号： | 201010565658.9 | 申请日： | 2010-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN102078027A | 公开（公告）日： | 2011-06-01 |
| 发明（设计）人： | 杨程;潘杰;王毅;赖永红;张家伟 | 申请（专利权）人： | 昆明贵勋科技有限公司 |
| 主分类号： | A24B15/20 | 分类号： | A24B15/20;A24B15/24;C12N1/20 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650091 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烟叶 浸提液 固体 平板 高温 分离 表面 微生物 方法 | ||
1.一种纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法，其特征在于：将充分浸泡3-5天废弃烟叶液作为烟叶浸提原液，以体积比计，烟叶浸提原液/自来水按5％-15％的量(V/V)与琼脂(2.5g/100mL)混合，不另添加任何附加成分和调节pH值，在0.11-0.13MPa下25-35分钟高压灭菌后，倒双层平皿，制得纯烟叶浸提液固体平板；
按常规将烟叶样品梯度稀释后，取0.2mL放入纯烟叶浸提液固体平板中，涂布均匀后置50℃-60℃恒温箱培养至菌落出现，分离筛选后得到在高温50℃-60℃还具有生理活性的烟叶表面微生物菌株——YN113、YN105、YN104、YN91，YN114菌株。
2.根据权利要求1所述的纯烟叶浸提液固体平板，其特征在于所述纯烟叶浸提液原液是指废弃烟叶充分浸泡2-3天的浸提液，其用量为与自来水的体积比为5％-15％。
3.根据权利要求1、2、3所述的纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法，其特征在于，所述的高温为涂布待分离样品平皿的培养温度是50℃-60℃。
4.根据权利要求1或2所述的纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法，其特征在于产淀粉酶菌株YN91的优化培养基为：小麦麸皮1.5％，尿素0.5％，NaCl 0.5％，工艺参数为发酵温度50℃，时间18h，搅拌速度125rpm。
5.根据权利要求1或2所述的纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物的方法，其特征在于产蛋白酶菌株YN114的优化培养基为：可溶性淀粉0.5％，牛肉膏1.0％，CaCO30.3％，工艺参数为发酵温度43℃，时间36h，搅拌速度125rpm。
6.根据权利要求1所述的纯烟叶浸提液固体平板高温分离烟叶表面微生物，其特征在于适合于真实反映烟叶表面生长高温微生物的分离培养，应用/作为烟叶烘烤用微生物的分离。
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