[发明专利]检测大鼠骨髓间充质干细胞表面分子标记的试剂盒及方法无效
申请号: | 201010569218.0 | 申请日: | 2010-11-26 |
公开(公告)号: | CN102094087A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
发明(设计)人: | 杨仕明;秦贺;赵立东;翟所强;郭维维;孙建和;杨伟炎 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 祁建国;梁挥 |
地址: | 100853*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 大鼠 骨髓 间充质 干细胞 表面 分子 标记 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测大鼠骨髓间充质干细胞表面分子标记的试剂盒,包括SEQ IDNo.1-SEQ ID No.10所示序列的引物。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒检测表面分子β-actin、SH2、CD44、CD34和CD31。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,进一步包括:
总RNA提取液,其包括Trizol溶液、氯仿溶液、异丙醇溶液、75%乙醇溶液、焦碳酸二乙酯处理的灭菌双蒸去离子水;
反转录公共混合液;
随机引物;
dNTP混合液,和
PCR反应公共液。
4.一种检测大鼠骨髓间充质干细胞表面分子标记的方法,包括:
A、获得骨髓间充质干细胞;
B、培养第三代大鼠骨髓间充质干细胞,获得RNA;
C、RT-PCR合成cDNA;
D、利用包括SEQ ID No.1-SEQ ID No.10所示序列以及按步骤C所获得的cDNA的PCR反应体系,进行PCR反应;和
E、电泳检测PCR反应的产物。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在步骤A中,利用24小时半量换液法获得骨髓间充质干细胞。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述表面分子标记为β-actin、SH2、CD44、CD34和CD31。
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