[发明专利]一种利用高效液相离子交换色谱测定低聚木糖的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相离子交换色谱测定低聚木糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）高效液相离子交换色谱系统与色谱条件：

美国Dionex ICS-3000 离子色谱系统，采用CarboPacTM PA200（3×250m）色谱柱带保护柱（3×50mm），柱温30℃，自动上样，进样体积10.0μL；以500mmol/L醋酸钠和100mmol/L氢氧化钠为淋洗液进行二元梯度淋洗，流速为0.3mL/min，在0～40min内醋酸钠溶液淋洗的浓度梯度为0～120mmol/L；电化学检测器检测模式为金工作电极和pH-Ag/AgCl复合型参比电极，采用积分脉冲安培检测法和色谱峰面积积分法测定糖组分的含量；

（2）低聚木糖标准工作方程的测定：

将木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖标准品配制成0.5～10 mg/L的标准溶液，采用步骤（1）中的色谱条件测定木糖至木六糖的标准工作方程和RT；

（3）木七糖和木八糖的色谱保留时间的确定：

以木糖至木六糖的NDP与步骤（2）测定的RT，进行线性回归计算出RT与NDP之间的线性关系式为：RT（min）=2.5785×NDP+1.9726，相关系数R²=0.9952；由该线性关系式计算出木七糖和木八糖的色谱保留时间； 

（4）低聚木糖成分的分析与测定：

将低聚木糖待测样品充分溶解于25～30℃的蒸馏水中，定容并调节待测低聚木糖组分的浓度1.0～8.0mg/L，在10000rpm条件下离心5min后以0.2μm微滤膜过滤上清液得样品液，采用步骤（1）中的色谱条件进行色谱检测；采用步骤（2）和（3）进行木二糖至木六糖的定量测定，及木七糖和木八糖的定性分析。

2.根据权利要求1所述的利用高效液相离子交换色谱测定低聚木糖的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的标准工作方程为：

木糖A=3.5218c₁－0.0193；

木二糖A=3.0798c₂－0.1026；

木三糖A =1.5199c₃－0.0031；

木四糖A =1.7209c₄－0.1158；

木五糖A =1.3676c₅－0.1513；

木六糖A =1.0952c₆－0.1537；

上述标准工作方程中，A表示色谱峰面积（nC??min），c表示糖组分的浓度（mg/L）。

3.根据权利要求1所述的利用高效液相离子交换色谱测定低聚木糖的方法，其特征在于，步骤（3）中，木七糖和木八糖的色谱保留时间分别为20.023min和22.601min。