[发明专利]一种血栓溶酶高产菌株及血栓溶酶的制备方法

权利要求书

1.一种血栓溶酶高产菌株，其特征在于：菌株属于菊芋小孢根霉菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号No.4368。

2.一种血栓溶酶的制备方法，其特征在于：制备方法的步骤是：

(1)挑取菊芋小孢根霉菌CGMCC No.4368，接种于种子培养基中，在28-32℃、150-170r/min条件下培养10-12h，得到种子培养液；

(2)将种子培养液以20％的接种量接种于发酵培养基上，28-32℃、170-175r/min培养50-70h，至产酶高峰期，得到发酵培养液；

(3)将上述发酵培养液低温高速离心除菌体，上清即为血栓溶酶粗酶液；

所述种子培养基与发酵培养基内包括碳源、氮源、水，pH自然。

3.根据权利要求2所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)前还包括将保藏的菊芋小孢根霉菌株CGMCC No.4368进行活化，将活化出菌株用于种子培养。

4.根据权利要求2所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述碳源为糊精、麸皮或淀粉中的一种或两种以上的组合物，所述氮源为铵盐、硝酸盐、豆粕、牛肉浸膏、蛋白胨或酵母浸膏中的一种或两种以上的混合物。

5.根据权利要求4所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述碳源优选糊精，其加入量为培养基总重量的1.0-1.5％。

6.根据权利要求4所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述氮源为优选豆粕和蛋白胨作为组合氮源，其加入量为培养基总重量的2％，其中蛋白胨既作为氮源，又作为诱导物。

7.根据权利要求2所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述血栓溶酶粗酶液，经饱和度为70％的硫酸铵水溶液进行盐析，对沉淀物质进行除盐，然后真空冷冻干燥机制成粉末，即得到血栓溶酶粗酶粉。

8.根据权利要求2或4所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述种子培养基的优选成分为每1L水含如下重量份数的成分：糊精15-25份、蛋白胨10-20份、pH自然，所述发酵培养基的优选成分为每1L水含如下重量份数的成分：糊精5-15份、蛋白胨15-25份、豆粕15-25份。

9.根据权利要求2所述的微生物血栓溶酶的制备方法，其特征在于：所述血栓溶酶粗酶液中的血栓溶酶的最适酶作用温度为37℃，最适酶作用pH为7.0。