[发明专利]一种蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种蓝靛果忍冬愈伤组织植株再生诱导培养基。

背景技术

蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)，别名蓝靛果，俗称山茄子、羊奶子、黑瞎子果等，为多年生落叶小灌木，是东北亚地区特有小桨果之一，其分布区域主要在俄罗斯、朝鲜北部、日本和中国东北的大小兴安岭、长白山、张广才岭等林区。

蓝靛果忍冬是继黑穗醋栗、树莓、越橘之后的又一种新兴的小浆果，主要生长在林中湿地或林缘、沼泽草甸，要求弱酸的土壤，上部枝条耐-40℃以上低温，适应性较强。

蓝靛果忍冬果实具有较高的营养保健价值，富含糖类、有机酸、矿物质、维生素等成分。所含17种氨基酸的总量高于普通水果，其中必需氨基酸占总量40％左右；矿质元素中锌、硒、铁、钙含量较高；果实可鲜食，也可加工成饮料、果酱、果糕和果酒等；另外，茎叶和果实又可提取天然紫红色素。

近年来随着蓝靛果忍冬市场需求不断增长，其鲜果价格也不断增高，近4年来由每公斤4元涨到每公斤10～15元，速冻果市场价格增至9500元/吨，浓缩汁国际市场价格为6.0～8.0万元/吨，饮品销售价为5～10元/瓶，市场供不应求。

随着对野生蓝靛果饮料、果酒、色素等产品开发，掠夺式采收导致野生资源锐减，加之资源分布有限，难以满足日益增长的市场需求，因此开展人工抚育与栽培十分必要。而制约人工栽培的主要问题是种苗繁殖困难，生产上主要采用扦插与分根、种子实生苗繁殖种，前者繁殖系数低，成活率不高，且破坏野生资源；后者种苗变异性较大，影响果实的品质与产量，且因种子粒小，成苗困难，育苗技术难度大。通过组织培养快速繁殖可以解决上述问题，国内植物组培快繁一般采用MS培养基，但因培养植物种类、取材时期、培养部位不同，其效果也不同。目前国内有关蓝靛果忍冬组培方面的报道较少，主要采取腋芽或茎尖培养，但效果不理想，尚没有直接分化芽丛的报道，需通过愈伤诱导植株，植株分化率不足30％，且未见在生产上应用。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有蓝靛果忍冬的组织培养主要采取腋芽或茎尖培养，存在植株分化率低及培养基成本高的问题，本发明提供了一种蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基。

本发明蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基，是由大量元素、微量元素和激素组成，其中所述大量元素由浓度为900～920mg/L的NH₄NO₃、90～100mg/L的KH₂PO₄、1000～1050mg/L的KNO₃、240～250mg/L的CaCl₂·2H₂O、200～210mg/L的MgSO₄·7H₂O和15～18mg/L的EDTA-Fe组成，所述微量元素由浓度为0.83mg/L的KI、22.3mg/L的MnSO₄·4H₂O、6.2mg/L的H₃BO₃、8.6mg/L的ZnSO₄·7H₂O、0.025mg/L的Na₂MoO₄·2H₂O、0.25mg/L的CuSO₄·5H₂O和0.025mg/L的CoCl₂·6H₂O，所述激素由浓度为1.0～2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)或者激动素(KT)和0.05～0.2mg/L的吲哚丁酸(IBA)或者萘乙酸(NAA)组成。

本发明在六月初(六月一号至六号)蓝靛果忍冬生长盛季采集其幼茎，用70％(体积)酒精浸泡10s，无菌水冲洗3遍，再用0.1％(质量)升汞液消毒8min，再无菌水冲洗3～5遍；接种至培养基时将蓝靛果忍冬幼茎两端剪去，接种于本发明的LD₁培养基表面；培养条件为：培养温度24～26℃，光照时间14～16h/d，光照强度1800～2000lx，20～30天继代一次。