[发明专利]具有靶向性溶血栓活性的寡肽、其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及了通式6a-f代表的具有靶向性溶血栓活性的寡肽及其制备方法，进一步涉及它们在大鼠动静脉旁路插管血栓模型上的溶血栓和抗血栓作用及应用，本发明属于生物医药领域。

背景技术

P6A(ARPAK)为纤维蛋白β链降解产物之一，具有溶血栓活性。在P6A的代谢研究中发现了代谢产物PAK。在大鼠动静脉旁路插管溶血栓模型上，PAK的溶血栓活性比母体P6A强。按照一般的认识，多肽在体内都会迅速降解。通过PAK的结构修饰延缓体内降解速率和提高溶血栓活性，是寡肽溶血栓药物研究的重要途径。通过RGD的结构修饰延缓体内降解速率和提高抗血栓活性，是寡肽抗血栓药物研究的重要途径。通过PAK和RGD相结合的结构修饰延缓体内降解速率和提高溶血栓活性，是具有溶血栓和抗血栓双重作用的寡肽药物研究的重要途径。按照一般的认识，含多肽的两亲性分子，例如脂肪醇链修饰的多肽，在适当的条件下通过分子间非共价键相互作用可发生自组装，形成纳米结构。借助纳米结构可改善多肽在体内的输送、延缓多肽在体内的降解速率和提高多肽的体内活性。根据这些认识，发明人提出了本发明。

发明内容

本发明的一个目的是提供具有靶向性溶血栓活性的寡肽。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一类具有靶向性溶血栓活性的寡肽，如通式6a-f所示：

其中n＝6、8、10、12、14或16。

本发明的另一个目的是提供一种制备所述具有靶向性溶血栓活性的寡肽的方法，包括如下步骤：

1)按照现有液相合成技术，逐步接肽合成Boc-Pro-Ala-Lys(Z)；

2)Boc-Asp(OBzl)与饱和脂肪醇缩合后再脱去侧链保护基得到Boc-Asp-OCH₂(CH₂)nCH₃，其中n＝6、8、10、12、14或16；

3)按照现有液相合成技术，逐步接肽合成Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl；

4)将Boc-Asp-OCH₂(CH₂)nCH₃与Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl缩合反应后脱去N端保护基得到Asp[Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl]-OCH₂(CH₂)nCH₃；

5)Boc-Pro-Ala-Lys(Z)与Asp[Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl]-OCH₂(CH₂)nCH₃缩合反应后，依次脱去C端保护基、侧链保护基和N端保护基得到目标化合物。

其中所述N端保护基是对多肽的N端进行保护时常用的保护基团，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)；所述C端保护基是对多肽的C端进行保护时常用的保护基团，例如可以是甲氧基(OMe)、苄氧基(OBzl)；所述侧链保护基是对多肽侧链进行保护时常用的保护基团，例如可以是苄基(Bzl)、苄氧基(OBzl)、硝基(NO₂)、苄氧羰基(Z)；所述液相合成技术及涉及的保护、缩合、脱保护的过程是本领域的常规并公知的技术。

其中缩合反应是在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下于无水THF中进行；脱去N端保护基如Boc是在含氯化氢的乙酸乙酯中进行；脱去C端保护基如OBzl是在甲醇中进行皂化；脱去侧链保护基如Z、OBzl、NO₂是在甲醇中发生氢解。

该制备方法可以用图1的路线概括，具体的，所述方法包括：

1)在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下Boc-Pro在无水THF中与对硝基酚(HONp)脱水形成Boc-Pro-ONp；

2)在含水的二氧六环中Boc-Pro-ONp与L-Ala缩合为Boc-Pro-Ala；

3)在DCC和HOBt存在下Boc-Pro-Ala在无水THF中与Lys(Z)-OBzl缩合为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl；

4)在甲醇中将Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl皂化为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)；