[发明专利]一种同时纯化和固定化亚油酸异构酶的方法

权利要求书

1.一种同时纯化和固定化亚油酸异构酶的方法，其特征在于该纯化和固定化方法包括以下步骤：

(1) 按安徽农业科学2010年 15期所述文章“德氏乳杆菌保加利亚亚种产亚油酸异构酶研究制备”的记载制备亚油酸异构酶发酵液，8000rpm离心10min，收集菌体，按发酵液：缓冲液为5:2的体积比将菌体悬浮于0.1mol/L pH=6.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中得缓冲液，同时添加质量占缓冲液体积0.5%的溶菌酶及质量占缓冲液体积0.2%的蜗牛酶，搅拌60min，离心10min，得上清粗酶液，在粗酶液中添加质量占缓冲液体积0.02%的阳离子聚丙烯酰胺絮凝剂，搅拌10-15min，过滤，收集滤液；

(2)按滤液与改性凹凸棒土以质量比4:1向依据步骤（1）获得的滤液中加入改性凹凸棒土，室温搅拌10-15h，真空过滤，得纯化和固定化亚油酸异构酶。

2.根据权利要求1所述的同时纯化和固定化亚油酸异构酶的方法，其特征在于所述改性凹凸棒土的制备包括以下步骤：将一定量的凹凸棒土加入到带有搅拌和冷凝装置的三颈瓶中，按1:12的质量/体积比加入2mol/L的盐酸，搅拌回流1-3h，用3mol/L的氢氧化钠溶液调节pH3.5，搅拌均匀，过滤，干燥，得酸改性凹凸棒土；将酸改性凹凸棒土按1:1的质量体积比加入2mol/L的硫酸镁溶液，室温搅拌3h，过滤，干燥，得硫酸镁处理凹凸棒土；硫酸镁处理凹凸棒土中按 1:1:1:2-3的质量比加入γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅、水、二甲苯，充分搅拌混合24-30h，过滤，水洗，干燥，得改性凹凸棒土。

3.根据权利要求1所述的同时纯化和固定化亚油酸异构酶的方法，其特征在于：阳离子型聚丙烯酰胺絮凝剂的分子量600万-800万。