[发明专利]一种茶树菇子实体多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种茶树菇子实体多糖的制备方法。属生物工程技术领域。

背景技术

茶树菇属担子菌纲，粪锈伞科，田菇属，又名茶菇、油茶菇、神菇。是近年来发展起来的一种食用菌新品种。茶树菇营养丰富，蛋白质含量高，含有人体必需的氨基酸，并且有丰富的B族维生素和钾、钠、钙、镁、铁、锌等矿质元素。中医认为该菇性平、甘温、无毒，具有较高的药用价值，有清热、平肝、明目、健脾的功效。其提取物多糖对小白鼠肉瘤S-180和艾氏腹水癌的抑制率高达80-90％，是一种集营养、保健、理疗于一身的绿色食品。

发明内容

本发明的目的是提供一种茶树菇子实体多糖的制备方法。

本发明的技术方案为：将茶树菇子实体通过粉碎，脱脂，热水浸提，离心，上清液浓缩，乙醇沉淀，脱蛋白，脱色，透析后冷冻干燥得到的。

本发明发明的茶树菇子实体多糖制备方法，提取得率为3.03g/100g子实体干重，测得多糖含量为67.3％。经初步的研究确认，基本无毒，可以作为原料应用于保健食品等领域。

具体来说，首先，我们用粉碎机将市售干燥的茶树菇子实体粉碎，然后用有机溶剂乙酸乙酯进行脱脂，80℃-90℃热水浸提，加水量为20倍体积脱脂后产物，总提取时间为12h，提取2次，提取液浓缩后加入4倍体积无水乙醇在4℃醇析，离心收集沉淀，乙醇，乙醚洗涤后用蒸馏水复溶，Sevage法去除游离蛋白，H₂O₂脱色、蒸馏水透析，冷冻干燥后得到茶树菇子实体多糖。

具体实施方式

下面的实例将具体说明本发明的操作方法，但不能作为对本发明的限定。

实例一

100g粉碎后的茶树菇子实体加入Soxhelt提取器，以乙酸乙酯作为溶剂，进行回流脱脂6h，收集固形物用热水浸提，提取温度80℃-90℃，加水量为20倍体积固形物，总提取时间为10h，提取3次，提取液浓缩后加入3倍体积95％乙醇在4℃醇析过夜，8000rpm离心得沉淀物，沉淀物用蒸馏水复溶后按多糖溶液1/5的体积加入氯仿，然后加入氯仿体积1/5的正丁醇，混合后振荡20min。蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶，4000rpm离心20min，收集上清液，反复操作8次至氯仿-正丁醇层不浑浊为止。然后在上清液中加入95％乙醇置4℃冰箱过夜，次日离心收集沉淀。沉淀物用蒸馏水复溶后将5％的多糖溶液用NaOH调pH至9.0，然后滴加20％的H₂O₂(用量为多糖溶液体积的15％)，保持PH8.0-9.0，4h后终止反应，加入95％乙醇置4℃冰箱过夜，次日离心收集沉淀。沉淀物用蒸馏水复溶后取50mL装入透析袋中，扎紧袋口，悬浮于蒸馏水中，透析48h，中间每隔12小时换水一次。冷冻干燥后得到茶树菇子实体多糖3.03g，用苯酚-硫酸法测得多糖含量为67.3％。