[发明专利]一种从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法。

背景技术

叶菊糖苷又称甜菊苷、甜菊糖苷、甜菊糖，是从甜叶菊植物中提取，属于天然无热量高倍甜味剂。它们是一类具甜味的萜烯类配糖体，为白色粉末。甜叶菊中主要含有甜菊糖苷St(Stevioside)、RA(Rebaudioside A)、RB(Rebaudioside B)、RC(Rebaudioside C)、RD(RebaudiosideD)和RE(Rebaudioside E)等。其中，甜菊糖苷St成分占糖苷总量的60％～70％，甜度为蔗糖的300倍，其次是RA，约占15％～20％，甜度为蔗糖的450倍，其它组分含量都较少。甜菊糖苷在低浓度的酸、碱性条件下稳定，耐热性强，不易降解，不会产生微生物所需的糖原，而且甜菊糖苷在人体内不参加代谢、不蓄积、无毒性，其安全性已得到国际FAO和WHO等组织的认可。我国卫生部自1985年和1990年分别批准甜菊糖苷为不限量使用的天然甜味剂和医药用甜味剂辅料。因此，甜菊糖苷有着广泛的应用范围和宽阔的市场前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法。

本发明一种从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法，方法，其特征在于从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法中包括以下步骤：

a.提取和除杂：甜叶菊干燥叶加纯水于浸提，过滤后得提取液；在提取液中加入FeSO₄·H₂O后用Ca(OH)₂调节pH到pH在8～9，搅拌，静置后过滤得浅黄色除杂提取液；

b.浓缩分离：除杂提取液用ADS-7大孔吸附树脂进行纯化，除杂提取液减压浓缩至1/3体积后上样，吸附饱和的树脂先用纯水进行冲洗除杂，然后60％的乙醇进行洗脱，收集60％乙醇的洗脱液，回收溶剂，干燥得甜菊糖苷粗品；

c.纯化：甜菊糖苷粗品用正丁醇∶乙醇∶水＝5∶1∶0.5流动相溶解后湿法上中压硅胶层析柱进行分离，用流动相展开，用紫外检测器于210nm处进行在线检测，收集色谱峰对应的流出液；将色谱峰对应的流出液进行减压干燥，得高纯度的甜菊糖苷St和RA。

本发明一种从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法，其特征在于从甜叶菊中制备高纯度甜菊糖苷的方法中包括以下步骤：

a.提取和除杂：甜叶菊干燥叶加15倍重量的纯水于60℃浸提2h，过滤后得提取液；

在提取液中加入甜叶菊干燥叶1/20重量的FeSO₄·H₂O后用Ca(OH)₂调节pH到pH在8～9，搅拌10min，静置20min后过滤得浅黄色除杂提取液；

b、浓缩分离：除杂提取液用ADS-7大孔吸附树脂进行纯化，除杂提取液减压浓缩至1/3体积后上样，ADS-7树脂吸附时的流速3BV/h，吸附饱和的树脂先用纯水进行冲洗，流速为4BV/h，用量为2BV进行除杂，然后用4BV的60％的乙醇进行洗脱，洗脱的速度为4BV/h；收集60％乙醇的洗脱液，回收溶剂，干燥得甜菊糖苷粗品；

c.纯化：甜菊糖苷粗品用正丁醇∶乙醇∶水＝5∶1∶0.5流动相溶解后湿法上中压硅胶层析柱进行分离，用流动相展开，流动相的速度为4BV/h，恒流泵的压力为9.5kgf/cm²，用紫外检测器于210nm处进行在线检测，收集色谱峰对应的流出液；使用5BV的流动相即可把甜菊糖苷洗脱出来，并且和杂质完全分开；将色谱峰对应的流出液进行减压干燥，得高纯度的甜菊糖苷St和RA。

本发明主要是从甜叶菊的提取液中利用树脂吸附和中压硅胶层析联合技术分离纯化甜菊糖苷St(Stevioside)和莱鲍迪苷A(Rebaudioside A)，以制备98％纯度的甜菊糖苷St和RA。