[发明专利]一种截短侧耳素的提取纯化方法

权利要求书

1.一种截短侧耳素的提取纯化方法，其特征是包括以下步骤：

（1）截短侧耳素粗品提取

将截短侧耳素干菌丝用甲基异丁基甲酮浸取多次，浸取后压滤得浸取液，浸取液浓缩、结晶、过滤、干燥得截短侧耳素粗品；

（2）纯化

2.1将截短侧耳素粗品加入甲醇水溶液中，搅拌至全溶；

2.2将上述溶液减压浓缩，浓缩至溶液沸点明显升高，馏出物基本无甲醇为止；

2.3向浓缩液中加入石油醚进行搅拌萃取，静置分层后进行分离，取水相，水相再次加入石油醚进行搅拌萃取，静置分层后分离得水相；

2.4将水相加入乙酸丁酯进行搅拌萃取，静置分层进行分离，取水相再次用乙酸丁酯萃取，两次萃取的乙酸乙酯相合并进入下一步；

2.5将上述乙酸乙酯相在浓缩结晶罐中进行真空蒸发，浓缩至溶液粘稠、基本无溶剂蒸出为止，然后向浓缩液中加入乙醚，逐渐降温至0-4℃，在此温度下结晶； 

2.6晶体完全析出后，将结晶分离，用冷乙醚洗涤，洗涤后过滤、干燥；

2.7将干燥后的晶体用乙酸乙酯溶解，用活性炭脱色，然后溶液滤去活性炭，采用步骤2.5、2.6的方法进行浓缩、结晶、过滤、干燥得截短侧耳素。

2.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征是截短侧耳素粗品提取的具体步骤为：

1.1向截短侧耳素干菌丝中加入甲基异丁基甲酮浸取三次，浸取后压滤，将三次所得的浸取液合并，第一次浸取所用截短侧耳素（g）与 甲基异丁基甲酮(ml)的比值为1：3-5，后两次浸取所用截短侧耳素（g）与甲基异丁基甲酮(ml)的比值为1：2-4，每次浸取时间均为1h；

1.2浸取液用降膜浓缩器浓缩至晶体含量为15～20wt%，然后转入结晶罐，在缓慢搅拌条件下，以5～10℃/h的降温速度降至0-4℃，保温至晶体完全析出；

1.3将晶体分离，用预冷的甲基异丁基甲酮洗涤，然后过滤，用真空干燥器干燥至晶体含湿量≤2%得截短侧耳素粗品；

1.4将结晶母液和甲基异丁基甲酮洗涤液合并，浓缩至截短侧耳素含量≥20%，然后降温结晶、甲基异丁基甲酮洗涤得截短侧耳素粗品，与步骤1.3中粗品混合，浓缩所得的甲基异丁基甲酮循环利用。

3.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.1中，截短侧耳素粗品（g）与甲醇水溶液(ml)的比值为1:8-15，甲醇水溶液的浓度为50-70体积%。

4.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.3中，第一次萃取时，石油醚的加入量为浓缩液的30-50体积%，第二次萃取时，石油醚的加入量为水相的30-50体积%，萃取时间均为15min。

5.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.4中，两次萃取乙酸乙酯的加入量（ml）为截短侧耳素粗品（g）的8-15倍，萃取时间为30min。

6.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.5中，乙醚的加入量（ml）为浓缩液（g）的8-15倍，降温速度为5～10℃/h。

7.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.6中，晶体干燥至干燥失重低于1%，干燥所用设备为真空烘箱或双锥干燥机。

8.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.5的结晶母液和步骤2.6的乙醚洗涤液合并，蒸馏回收乙醚。

9.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.7中，乙酸乙酯的加入量（ml）为晶体（g）的8-15倍，脱色时活性炭的用量为溶液的3-5wt%，脱色温度为50-60℃，脱色时间为30min。

10.根据权利要求1或2所述的提取纯化方法，其特征是：步骤2.1中，截短侧耳素粗品（g）与甲醇水溶液(ml)的比值为1:10，甲醇水溶液的浓度为60体积%；步骤2.4中，两次萃取乙酸乙酯的加入量（ml）为截短侧耳素粗品（g）的10倍；步骤2.5中，乙醚的加入量（ml）为浓缩液（g）的10倍；步骤2.7中，乙酸乙酯的加入量（ml）为晶体（g）的10倍。