[发明专利]口蹄疫杂交瘤细胞株、单克隆抗体、检测试剂和试剂盒

权利要求书

1.一种杂交瘤细胞株，系由亲代细胞与骨髓瘤细胞融合而制成，其特征如保藏号为PTA-11304之细胞株所示，该亲代细胞系由原核细胞所表达之口蹄疫病毒之由3ABC基因片段所编码之非结构蛋白作为抗原免疫至小鼠，并将该小鼠体内之脾脏细胞取出而制成，且该杂交瘤细胞株所生产之单克隆抗体能够专一性辨识口蹄疫病毒之该3ABC肽，且对于猪水疱病抗血清不会产生非特异性反应。

2.根据权利要求1所述之杂交瘤细胞株，系制备自口蹄疫病毒O/TAW/99病毒株，其分泌的单克隆抗体同时对O/TAW/97病毒株会产生专一性的结合。

3.根据权利要求2所述之杂交瘤细胞株，该非结构蛋白系衍生自该口蹄疫病毒2C、3A、3AB、3BC及3ABC基因片段之一高度保守区域(highly conserved region)。

4.根据权利要求3所述之杂交瘤细胞株，该非结构蛋白3ABC基因片段之该高度保守区域具有如SEQ ID NO：1之核酸与氨基酸序列。

5.根据权利要求1所述之杂交瘤细胞株，该小鼠系为Balb/c品系小鼠。

6.根据权利要求1所述之杂交瘤细胞株，该原核细胞系为大肠杆菌。

7.根据权利要求1所述之杂交瘤细胞株，该单克隆抗体同时对于O型以外的口蹄疫病毒如血清型A型、C型、Asia 1型、SAT 1型、SAT 2型及SAT 3型等皆有专一性反应。

8.一种单克隆抗体，其特征在于该单克隆抗体系由权利要求1至7中任一项所述之杂交瘤细胞株所产生，且对于口蹄疫病毒之3ABC肽具有专一性辨识能力，而对于猪水疱病之抗血清不会产生非特异性反应。

9.根据权利要求8所述之单克隆抗体，其特征在于该口蹄疫病毒系为血清型O型(O serotype)。

10.根据权利要求9所述之单克隆抗体，其特征在于该口蹄疫病毒系为O/TWA/99病毒株。

11.根据权利要求8所述之单克隆抗体，其特征在于该单克隆抗体对于口蹄疫病毒血清型A型、C型、Asia 1型、SAT 1型、SAT 2型或SAT 3型有交叉反应，即可辨识口蹄疫七种血清型。

12.一种免疫检测试剂，系用于酶联免疫吸附试验(ELISA)，藉以检测一待测抗原，其特征在于该免疫检测试剂包含有权利要求9所述之单克隆抗体。

13.如权利要求12所述之免疫检测试剂，该待测抗原系为抗口蹄疫病毒3ABC蛋白之抗体(anti-3ABC antibody)。

14.一种免疫检测试剂盒，系利用夹心酶联免疫吸附试验检测待测检体中的抗口蹄疫病毒3ABC蛋白之抗体(anti-3ABC antibody)，其特征在于该免疫检测试剂盒包含有如权利要求8所述之单克隆抗体及侦测试剂。

15.如权利要求14所述之免疫检测试剂盒，进一步包含有抗原样本，该抗原样本系衍生自口蹄疫病毒之3ABC肽。

16.如权利要求14所述之免疫检测试剂盒，该侦测试剂包含有侦测抗体及讯号产生物质。

17.如权利要求16所述之免疫检测试剂盒，该侦测抗体与该讯号产生物质系为共轭结合。

18.如权利要求16所述之免疫检测试剂盒，该讯号产生物质系选自下列所构成的群组之一：放射性标记物、磷光标记物、冷光标记物、荧光标记物及酶。

19.如权利要求18所述之免疫检测试剂盒，该冷光标记物系为化学冷光标记物或生物冷光标记物。

20.如权利要求18所述之免疫检测试剂盒，该酶系选自下列所构成的群组之一：过氧化氢酶(Hydrogen peroxidase)、辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase；HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline Phospatase；AP)、以及Beta-半乳糖苷酶(Beta-galactosidase)。

21.如权利要求20所述之免疫检测试剂盒，进一步包含有生物素及抗生物素蛋白，该生物素系与该侦测抗体连接，且该抗生物素蛋白系与该酶连接。