[发明专利]一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201010591434.5 | 申请日： | 2010-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN102115718A | 公开（公告）日： | 2011-07-06 |
| 发明（设计）人： | 严明;安芳芳;郝宁;李艳;许琳;魏淼;王珊珊;刘欢 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/56;C12N9/38;C12R1/84 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表达 半乳糖 重组 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种表达β-半乳糖苷酶的重组菌株，其特征在于该菌株为基因组DNA上整合了来源于嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)HB27的β-半乳糖苷酶基因bgal的毕赤酵母。
2.权利要求1所述的表达β-半乳糖苷酶的重组菌株的构建方法，其特征在于将来自嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)HB27的β-半乳糖苷酶基因bgal克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中，利用SacI限制性内切酶线性化载体后，将其转化至毕赤酵母中，利用G418抗生素进行多拷贝转化子筛选得到。
3.权利要求1所述的表达β-半乳糖苷酶的重组菌株高效表达β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于以甲醇为诱导剂诱导培养重组菌株产酶，每3L发酵液培养菌体生长35h，OD600达到450后，以流加形式加入甲醇，加入总量为1.0～1.5L的甲醇，诱导时间为40～48h。
4.权利要求1所述的表达β-半乳糖苷酶的重组菌株，发酵生产的β-半乳糖苷酶在巴氏消毒法的应用。
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