[发明专利]台勾霉素的生物合成基因簇及其应用

权利要求书

1.一种台勾霉素的生物合成基因簇，其特征在于，该生物合成基因簇的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示，包含31个基因，具体为：

1)聚酮合成酶基因，即tiaA1、tiaA2、tiaA3、tiaA4共4个基因：

tiaA1位于基因簇核苷酸序列第41491-57180个碱基处，长度为15690个碱基对，编码聚酮合成酶，5229个氨基酸；

tiaA2位于基因簇核苷酸序列第57186-66803个碱基处，长度为9618个碱基对，编码聚酮合成酶，3205个氨基酸；

tiaA3位于基因簇核苷酸序列第66829-71337个碱基处，长度为4509个碱基对，编码聚酮合成酶，1502个氨基酸；

tiaA4位于基因簇核苷酸序列第71361-81746个碱基处，长度为10386个碱基对，编码聚酮合成酶，3461个氨基酸；

2)脱氧糖基的生物合成基因，即tiaS1、tiaS2、tiaS3、tiaS4、tiaS5、tiaS6、tiaG1、tiaG2共8个基因：

tiaS1位于基因簇核苷酸序列第8508-7492个碱基处，长度为1017个碱基对，编码GDP-D-甘露糖4，6-脱水酶，338个氨基酸；

tiaS2位于基因簇核苷酸序列第9742-8534个碱基处，长度为1209个碱基对，编码C-甲基转移酶，402个氨基酸；

tiaS3位于基因簇核苷酸序列第10785-9787个碱基处，长度为999个碱基对，编码GDP-甘露糖4，6-脱水酶，332个氨基酸；

tiaS4位于基因簇核苷酸序列第21789-22820个碱基处，长度为1032个碱基对，编码GDP-甘露糖4，6-脱水酶，343个氨基酸；

tiaS5位于基因簇核苷酸序列第33022-34347个碱基处，长度为1326个碱基对，编码糖O-甲基转移酶，441个氨基酸；

tiaS6位于基因簇核苷酸序列第38882-40021个碱基处，长度为1140个碱基对，编码O-酰基转移酶，379个氨基酸；

tiaG1位于基因簇核苷酸序列第7441-6044个碱基处，长度为1398个碱基对，编码糖基转移酶，465个氨基酸；

tiaG2位于基因簇核苷酸序列第20351-21772个碱基处，长度为1422个碱基对，编码糖基转移酶，473个氨基酸；

3)2，4-二羟基-3，5-二氯-6-乙基苯甲酸合成酶基因，即tiaE、tiaF、tiaB、tiaM共4个基因：

tiaE位于基因簇核苷酸序列第14006-13260个碱基处，长度为747个碱基对，编码II型硫酯酶，248个氨基酸；

tiaF位于基因簇核苷酸序列第14189-15220个碱基处，长度为1032个碱基对，编码酰基载体蛋白合成酶/缩合酶，343个氨基酸；

tiaB位于基因簇核苷酸序列第15220-20349个碱基处，长度为5130个碱基对，编码可重复利用的聚酮合成酶，1709个氨基酸；

tiaM位于基因簇核苷酸序列第37305-38789个碱基处，长度为1485个碱基对，编码卤化酶，494个氨基酸；

4)异丁酰基合成基因，即tiaC、tiaD共2个基因：

tiaC位于基因簇核苷酸序列第11219-12280个碱基处，长度为1062个碱基对，编码支链α酮酸脱氢酶的E1α亚单元，353个氨基酸；

tiaD位于基因簇核苷酸序列第12277-13254个碱基处，长度为978个碱基对，编码支链α酮酸脱氢酶的E1β亚单元，325个氨基酸；

5)甲基丙二酰辅酶A和乙基丙二酰辅酶A合成基因，即tiaJ、tiaK、tiaL、tiaN共4个基因：

tiaJ位于基因簇核苷酸序列第27166-28398个碱基处，长度为1233个碱基对，编码3-羟乙酰基-辅酶A脱氢酶，410个氨基酸；

tiaK位于基因簇核苷酸序列第28395-29759个碱基处，长度为1368个碱基对，编码巴豆酰基-辅酶A还原酶/羧化酶，454个氨基酸；

tiaL位于基因簇核苷酸序列第29770-31200个碱基处，长度为1431个碱基对，编码丙酰-辅酶A羧化酶，476个氨基酸；

tiaN位于基因簇核苷酸序列第82097-83296个碱基处，长度为1200个碱基对，编码烯酰-辅酶A水合酶/异构酶，399个氨基酸；

6)环骨架后修饰基因，即tiaP1、tiaP2，共2个基因：

tiaP1位于基因簇核苷酸序列第32479-31301个碱基处，长度为1179个碱基对，编码细胞色素P-450氧化酶，392个氨基酸；

tiaP2位于基因簇核苷酸序列第41304-40105个碱基处，长度为1200个碱基对，编码细胞色素P-450氧化酶，399个氨基酸；

7)调节、抗性和未知功能基因，即tiaI、tiaR1、tiaR2、tiaT1、tiaT2、tiaT3、tiaT4共7个基因：

tiaI位于基因簇核苷酸序列第26853-24502个碱基处，长度为2352个碱基对，编码ATP-依赖的DNA解螺旋酶，783个氨基酸；

tiaR1位于基因簇核苷酸序列第34415-37186个碱基处，长度为2772个碱基对，编码LuxR家族转录调节因子，923个氨基酸；

tiaR2位于基因簇核苷酸序列第88114-88527个碱基处，长度为414个碱基对，编码TetR家族转录调节因子，137个氨基酸；

tiaT1位于基因簇核苷酸序列第24505-22880个碱基处，长度为1626个碱基对，编码膜转运蛋白，541个氨基酸；

tiaT2位于基因簇核苷酸序列第83304-84590个碱基处，长度为1287个碱基对，编码膜转运蛋白，428个氨基酸；

tiaT3位于基因簇核苷酸序列第85955-84642个碱基处，长度为1314个碱基对，编码NitT/TauT家族ABC转运蛋白，437个氨基酸；

tiaT4位于基因簇核苷酸序列第87757-86003个碱基处，长度为1755个碱基对，编码NitT/TauT家族ABC转运蛋白，584个氨基酸。