[发明专利]微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法

权利要求书

1.一种微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，包括：

(1)向培养液中接入爪哇正青霉(Eupenicillium javanicum)CGMCC NO.3.5706，得到预反应体系；

(2)向步骤(1)得到的预反应体系中加入异黄腐酚溶液，于25-30℃转化反应5-7天得到转化后的培养液；其中，异黄腐酚用量以每升培养液计为0.01-0.1g；

(3)转化后的培养液经后处理得到8-异戊烯基柚皮素。

2.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的培养液为低葡萄糖马铃薯液体，其中马铃薯的质量百分比浓度为20％，葡萄糖的质量百分比浓度为1％；

所述的爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706为爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706孢子悬浮液；

所述的培养液与爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706孢子悬浮液的体积比为20-40；接入菌种后于25-30℃培养0-3天得到预反应体系。

3.根据权利要求2所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，所述的爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706孢子悬浮液中爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706孢子的浓度为10⁶个/毫升-10⁸个/毫升；

所述的培养液与爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706孢子悬浮液的体积比为30；接入菌种后于28℃培养培养3天得到预反应体系。

4.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的培养液为葡萄糖溶液，其中葡萄糖的质量百分比浓度为1％-2％；

所述的爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706为爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞，其中培养液的毫升数：爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞的克数＝6-10。

5.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的培养液为pH值为6.0-7.2的磷酸缓冲液；

所述的爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706为爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞，其中培养液的毫升数：爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞的克数＝6-10。

6.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的培养液为含有吐温80的磷酸缓冲液溶液，其中吐温80的体积百分比浓度为0.2％-0.8％，pH为6.0-7.2；

所述的爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706为爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞，其中培养液的毫升数：爪哇正青霉CGMCC NO.3.5706湿细胞的克数＝6-10。

7.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的转化反应条件温度为28℃；所述的转化时间为6天。

8.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的异黄腐酚溶液为异黄腐酚的无水乙醇溶液。

9.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的异黄腐酚用量以每升培养液计为0.02g。

10.根据权利要求1所述的微生物细胞催化异黄腐酚合成8-异戊烯基柚皮素的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述后处理包括：将转化后的培养液进行离心处理得到上清液，用乙酸乙酯萃取后得到萃取液，经浓缩得到8-异戊烯基柚皮素。