[发明专利]一种筛选治疗脑损伤药物的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种筛选脑损伤药物的方法，具体涉及一种用核磁共振技术筛选治疗脑损伤药物的方法。本发明还提供突触后致密物质-95(PSD-95)的PDZ2结构域的核磁共振指纹图谱。

背景技术

现有技术公开了N-methyl-D-aspartate受体(NMDAR)是一种离子型的谷氨酸受体，在中枢神经系统的发展过程中，对于神经元分化、迁移、突触的形成、以及轴突的生长形态起关键作用。但是，NMDAR的持续过激导致的细胞内一氧化氮(NO)的过量生产将引起缺血缺氧性神经损伤，其代表病例为通常称谓的中风。

现代医学研究发现，在经由NMDAR进入后突触神经元的钙流的过度刺激下，nNOS产生的过量NO是导致中风类神经损伤的一个主要原因。由于NMDAR及nNOS参与多种重要的细胞生理活动，用NMDAR或nNOS的直接抑制剂来治疗NO过量导致的神经损伤通常会引发细胞毒性等副作用，因而近年来医学研究一直在寻找其替代疗法。PSD-95蛋白由于其PDZ2结构域在NMDAR/nNOS通路中起到重要的支架作用[1，2]，而成为一类针对NO过量生产引发的神经损伤的极有潜力的药物靶标：可以通过小分子化合物阻断NMDAR/PSD-95/nNOS复合体的形成，进而切断NMDAR与nNOS的物理偶联来抑制中风。有关生化研究表明，阻断PSD-95PDZ结构域上nNOS的结合位点在理论上是可行的[3-5]。研究还表明，神经细胞中PSD-95的缺失将减少NO的生成并抑制兴奋性中毒，而NMDAR的正常生理活性不受影响[6，7]。Aarts等的体内及体外实验还证实，小肽可以通过阻碍NMDAR NR2B与PSD-95的相互结合而具有神经保护作用[6]。这些研究结果表明，破坏PSD-95与NMDAR或nNOS之间的相互作用可能代表一种治疗NMDAR介导的神经毒性的极具潜力的替代疗法。

与本发明相关的现有技术有下述参考文献：

1.Kornau，H.C.，et al.，Domain interaction between NMDA receptor subunits and thepostsynaptic density protein PSD-95.Science，1995.269(5231)：p.1737-40.

2.Brenman，J.E.，et al.，Interaction of nitric oxide synthase with thepostsynaptic density protein PSD-95 and alphal-syntrophin mediated by PDZdomains.Cell，1996.84(5)：p.757-67.

3.Tochio，H.，et al.，Solution structure and backbone dynamics of the second PDZdomain of postsynaptic density-95.J Mol Biol，2000.295(2)：p.225-37.

4.Tochio，H.，et al.，Formation of nNOS/PSD-95PDZ dimer requires a preformedbeta-finger structure from the nNOS PDZ domain.J Mol Biol，2000.303(3)：p.359-70.

5.Tochio，H.，et al.，Solution structure of the extended neuronal nitric oxidesynthase PDZ domain complexed with an associated peptide.Nat Struct Biol，1999.6(5)：p.417-21.

6.Aarts，M.，et al.，Treatment of ischemic brain damage by perturbing NMDAreceptor-PSD-95 protein interactions.Science，2002.298(5594)：p.846-50.

7.Sattler，R.，et al.，Specific coupling of NMDA receptor activation to nitricoxide neurotoxicity by PSD-95 protein.Science，1999.284(5421)：p.1845-8.