[发明专利]一种鉴定基因抗盐功能的方法

权利要求书

1.检测植物中目标基因是否具有抗盐功能的方法，包括如下步骤：

利用病毒诱导的基因沉默方法将目的植物中目标基因的功能丧失，得到的植物记作基因沉默植物；对所述基因沉默植物进行盐胁迫处理，检测盐胁迫处理后的基因沉默植物的与盐胁迫有关的性状，若所述盐胁迫处理后的基因沉默植物表现出耐盐性状，则确定所述目标基因具有抗盐功能。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述利用病毒诱导的基因沉默方法将目的植物中目标基因的功能丧失的方法包括如下步骤：将目标基因的部分片段插入pTRV2载体的多克隆位点间，得到重组载体；将得到的重组载体与pTRV1载体共同导入所述目的植物中。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

所述目标基因的部分片段位于所述目标基因的开放读码框区域或5′和3′非编码区域。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述对所述基因沉默植物进行盐胁迫处理的方法为对所述基因沉默植物的离体叶盘进行盐胁迫处理或对所述基因沉默植物的完整植株进行盐胁迫处理。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述对所述基因沉默植物的离体叶盘进行盐胁迫处理的方法包括如下步骤：取所述基因沉默植物的叶盘，得到离体叶盘，将离体叶盘分别浸泡在100mM和200mM NaCl水溶液中处理3天。

6.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述对所述基因沉默植物的完整植株进行盐胁迫处理的方法包括如下步骤：用含有200mM NaCl的溶液浇灌所述基因沉默植物的根系，处理20天。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述与盐胁迫有关的性状为如下1)-5)所示性状中的至少一种：

1)所述离体叶盘中叶绿素含量；

2)所述基因沉默植物的叶片萎蔫程度、根的长度和/或根的数量；

3)所述基因沉默植物的株高；

4)所述基因沉默植物的鲜重和/或干重；

5)所述基因沉默植物的光合速率。

8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述盐胁迫处理后的基因沉默植物表现出耐盐性状为如下1)-5)中所示的至少一种：

1)所述基因沉默植物的离体叶盘中叶绿素含量显著低于野生型对照；

2)所述基因沉默植物与野生型对照相比，叶片显著枯萎并下垂、根的长度显著降低和/或根的数量显著减少；

3)所述基因沉默植物的株高显著低于野生型对照；

4)所述基因沉默植物的鲜重和/或干重显著低于野生型对照；

5)所述基因沉默植物的光合速率显著低于野生型对照；

所述野生型对照为野生型植物。

9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物；所述双子叶植物为番茄。

10.病毒诱导的基因沉默方法在检测植物中待功能鉴定基因是否与具有抗盐功能中的应用。