[发明专利]非洲爪蟾白细胞介素8的cDNA及其克隆方法和重组应用无效
申请号: | 201010599005.2 | 申请日: | 2010-12-21 |
公开(公告)号: | CN102121014A | 公开(公告)日: | 2011-07-13 |
发明(设计)人: | 张双全;崔县伟 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C12N15/24 | 分类号: | C12N15/24;C12N15/10;C12N15/09;A61K38/20;A61P37/04;C07K14/54 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 210046 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 非洲 白细胞 cdna 及其 克隆 方法 重组 应用 | ||
1.非洲爪蟾白细胞介素8的cDNA,其特征在于它的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述的非洲爪蟾白细胞介素8的cDNA的克隆方法,其特征在于步骤如下:
(1)TRIzol法从非洲爪蟾脾脏中提取总RNA,
(2)根据非洲爪蟾白细胞介素8的mRNA序列设计引物
正义寡核苷酸引物:XtIL-8F:5’-atg gaa acc aag aga agt gtc ctg-3’
反义寡核苷酸引物:XtIL-8R:5’-tta aag agc aga aac agg tgt ct-3’,
(3)通过RT-PCR的方法,以上述引物XtIL-8F及 XtIL-8R为特异性引物,扩增出约312bp的片段,克隆入pMD-19T载体,挑取阳性克隆进行序列碱基测定。
3.一种权利要求1所述的非洲爪蟾白细胞介素8cDNA的重组应用,是通过现有基因工程的方法,生产重组的非洲爪蟾白细胞介素8,作为两栖类动物的免疫增强剂。
4.非洲爪蟾白细胞介素8,其特征在于它的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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