[发明专利]用于检测胃癌易感性的试剂盒无效
申请号: | 201010599417.6 | 申请日: | 2010-12-22 |
公开(公告)号: | CN102108411A | 公开(公告)日: | 2011-06-29 |
发明(设计)人: | 韩俊领;刘志霈;周毓玲;杜宏伟;李楠;靳霞;刘蓉华 | 申请(专利权)人: | 协和干细胞基因工程有限公司;天津滨海协和基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 天津才智专利商标代理有限公司 12108 | 代理人: | 王晓红 |
地址: | 300384 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 胃癌 感性 试剂盒 | ||
1.一种用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于,包括:MTHFR基因的rs1801133位点、CYP2E1的rs2031920位点、XRCC1基因的rs25478位点、ADPRT基因的rs1136410位点的特异性引物及对应的延伸探针,Taq酶,dNTP混合液,MgCl2溶液,10×PCR反应缓冲液,ExoI,SAP,10×SAP反应缓冲液,Extension Dilution Buffer,10×Extension Mix,DNA polymerase,Hybridization Solution,Hybridization Additive,20×Wash Buffer 1,64×Wash Buffer 2,去离子水,微阵列芯片。
2.根据权利要求1所述的用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于:所述的特异性引物对是针对MTHFR基因的rs 1801133位点,CYP2E1的rs2031920位点,XRCC1基因的rs25478位点,ADPRT基因的rs1136410位点,能特异性扩增出包括上述SNP位点的DNA片段的引物对。
3.根据权利要求1所述的用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于:所述的特异性延伸探针是针对MTHFR基因的rs1801133位点,CYP2E1的rs2031920位点,XRCC1基因的rs25478位点,ADPRT基因的rs1136410位点而设计,能通过单核苷酸延伸和微阵列技术检测出这四个SNPs位点基因型的探针。
4.根据权利要求1所述的用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于:所含的特异性引物对选自具有SEQ ID NO:1,2所示核苷酸序列的引物对、具有SEQ ID NO:3,4所示核苷酸序列的引物对、具有SEQ ID NO:5,6所示核苷酸序列的引物对以及具有SEQ ID NO:7,8所示核苷酸序列的引物对。
5.根据权利要求1所述的用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于:所含的特异性延伸探针选自具有SEQ ID NO:9、10、11和12所示的延伸探针。
6.根据权利要求1所述的用于检测胃癌易感性的试剂盒,其特征在于:试剂盒的组分和含量包含250ul 10×PCR反应缓冲液,20ul 10mM dNTP混合液,450ul 25mM MgCl2溶液,45ul 5U/ul Taq DNA聚合酶,50ul每条10uM的8条特异性引物混合液,15ul每条10uM的4条特异性延伸探针混合液,90ul10U/ul ExoI,450ul 1U/ul SAP,140ul 10×SAP反应缓冲液,1700ulExtension Dilution Buffer,90ul 10×Extension Mix,10ul DNApolymerase,3500ul Hybridization Solution,200ul HybridizationAdditive,2500ul 20×Wash Buffer 1,800ul 64×Wash Buffer 2,去离子水20ml,一个供380人份检测应用的384孔12重微阵列芯片,试剂盒保存温度为-20℃。
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