[发明专利]一种适用于赤藓红色素的人工抗原的合成方法无效
| 申请号： | 201010600940.6 | 申请日： | 2010-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN102120774A | 公开（公告）日： | 2011-07-13 |
| 发明（设计）人： | 匡华;胥传来;李灼坤;邢常瑞;宋珊珊;刘丽强;王利兵 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;G01N33/533 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 红色素 人工 抗原 合成 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种适用于赤藓红色素的人工抗原的合成方法，其特征是以荧光素FLS为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联，用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比；步骤为：
（1）人工抗原的合成：投料配比为荧光素FLS︰N-羟基硫代琥珀酰亚胺︰碳二亚胺︰牛血清白蛋白的摩尔比控制为60︰68︰90︰1；荧光素FLS溶于含二甲基吡啶的戊二酸酐的无水乙醇和吡啶混合溶液中，75℃搅拌24h后用真空旋转蒸发提纯，再加N,N-二甲基甲酰胺DMF溶剂溶解后，加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺和碳二亚胺搅拌反应8h，为A液；牛血清白蛋白溶于0.01M、pH7.4的PBS缓冲液中，为B液；将A液逐滴加入到B液中，室温下搅拌反应6h，离心取上清液，获得荧光素FLS-BSA偶联物混合液，即为适用于赤藓红的人工抗原混合液；
透析袋前处理：取10cm的透析袋，于沸水中煮沸5min，再用60℃的去离子水冲洗3min，保存在4℃去离子水中备用；
将人工抗原混合液移入透析袋中，用每次2L的0.01M的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液透析，透析2次，再用每次2L的去离子水透析，透析2次，共透析3天；最后使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末，获得荧光素FLS-BSA偶联物，即为适用于赤藓红的人工抗原；
（2）人工抗原的鉴定：荧光素FLS-BSA偶联物采用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其偶联比。
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