[发明专利]一种通过温度突变提高哺乳动物细胞重组蛋白瞬时表达的方法有效
申请号: | 201010603657.9 | 申请日: | 2010-12-24 |
公开(公告)号: | CN102533722A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 马宁宁;张延静;潘范彬;王文志;谢良志 | 申请(专利权)人: | 北京义翘神州生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N5/10 |
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地址: | 100176 北京市经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通过 温度 突变 提高 哺乳动物 细胞 重组 蛋白 瞬时 表达 方法 | ||
1.一种通过温度突变增强重组蛋白在哺乳动物细胞中瞬时表达的方法,其特征在于:
(1)温度突变发生在将外源DNA加入细胞培养液之前,升高细胞培养温度,持续至外源DNA加入细胞培养液后一段时间,再恢复至升高前水平;或
(2)温度突变发生在将外源DNA加入细胞培养液之前,升高细胞培养温度,持续一段时间后,再恢复至升高前水平,然后将外源DNA加入细胞培养液;或
(3)温度突变发生在将外源DNA加入细胞培养液之后,升高细胞培养温度,持续一段时间后,再恢复至升高前水平。
2.权利要求1中所述的方法,其中温度突变是从35.0~38.0℃,升高到38.5~42.0℃,再恢复至35.0~38.0℃。
3.权利要求1中所述的方法,其中温度突变开始时间发生在外源DNA加入细胞培养液之前的0-24小时,或之后的0-24小时。
4.权利要求1中所述的方法,其中温度突变持续时间为0-24小时。
5.权利要求1中所述的方法,其中哺乳动物细胞为中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人胚肾细胞(HEK293)、COS、BHK21、SP2/0或NIH/3T3。
6.权利要求1中所述的哺乳动物细胞为人胚肾细胞(HEK293)或中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。
7.权利要求1中所述的重组蛋白为蛋白、抗体、抗体片段、或多肽。
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