[发明专利]一种同时制备土木香内酯和异土木香内酯的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种同时制备土木香内酯和异土木香内酯的方法，尤其是涉及一种柱层析与逆流色谱结合分离纯化土木香内酯和异土木香内酯的方法。

背景技术：

土木香内酯和异土木香内酯，均为倍半萜类化合物，分子式C₁₅H₂₀O₂，分子量232.32；分子结构式分别为：

土木香内酯                        异土木香内酯

来源于菊科植物土木香Inula helenium L.的干燥根。土木香有健脾和胃，行气止痛，安胎的功效。用于胸胁、脘腹胀痛，呕吐泻痢，胸胁挫伤，岔气作痛，胎动不安。土木香内酯和异土木香内酯是土木香的主要活性成分，《中国药典》2010年版规定其提木香内酯和异土木香内酯的总量不得少于2.2％。

现代药理研究表明，0.1μg/ml土木香内酯可抑制感染人型结核杆菌，对金黄色葡萄菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、真菌也有抑制作用，土木香内酯及其衍生物的化学结构与山道年类似，也有驱虫作用，且该作用好于山道年而毒性较低。土木香内酯低浓度对心脏有兴奋作用，高浓度时则有抑制作用，对离体兔子宫和兔肠运动有抑制作用，但在低浓度时有兴奋作用。土木香内酯也有一定的毒性，如升高血糖，降低白细胞的活力，严重者引起呼吸停止而死亡。异土木香内酯对人脑神经胶质瘤细胞、人肝癌细胞、人和色素瘤细胞和人乳腺癌脑转移肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用。

目前，土木香内酯和异土木香内酯的提取方法多是乙醇提取或超临界萃取，硅胶柱层析。

如专利(申请号200810055376.7)“一种异土木香内酯的提纯制备方法和其在制备抗肿瘤药物中的应用”，该发明的方法是90-99％的乙醇冷浸提取，浓缩得浸膏悬浮在饱和盐水中，石油醚萃取，无水硫酸钠脱水，硅胶柱色谱分离，得到异土木香内酯。

专利(申请号200810201250.6)“用于促进胃动力的土木香提取物的提取方法”，该发明公开了超临界萃取法和乙醇提取法，得到土木香提取物。

上述方法具有原料利用率低、制备量小或纯度低等缺陷。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种利用高速逆流色谱法纯化土木香内酯和异土木香内酯的方法。

本发明所述的一种同时制备土木香内酯和异土木香内酯的方法，其特征在于按下列步骤进行：

一种同时制备土木香内酯和异土木香内酯的方法，其特征在于按下列步骤进行：

(1)取土木香粉碎后用80-100％工业甲醇超声提取3-5次，合并提取液加入针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，减压浓缩；

(2)将浓缩液以热水分散，加入层析柱，乙醇水溶液洗脱，气相色谱跟踪监测，浓缩洗脱液，水洗涤结晶；

(3)采用高速逆流色谱仪，溶剂系统由正己烷、乙酸乙酯、乙腈和水组成，体积比为9-16∶3-9∶4-8∶1-3，置于分液漏斗中，上相为固定相，下相为流动相，取步骤(2)粗结晶溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动，泵入流动相，当流动相流出时，连续进样，根据检测器谱图收集目标成分，浓缩，低温干燥即得产品。

所述步骤(1)中活性炭用量为提取液总质量的1-5‰。

所述步骤(2)中柱层析填料为MCI-GEL、MS24-SZ聚酰胺树脂、硅胶(100-200目)中的任一种。

所述步骤(2)中柱层析所用的洗脱剂可以选70-100％甲醇水溶液或60-95％乙醇水溶液中的一种。

所述步骤(3)中高速逆流色谱仪流速控制在1.5-2.8ml/min。

所述步骤(3)中高速逆流色谱仪主机转速为720-880rpm.。

本发明与现有技术相比具有如下的优点及有益效果：

1)本发明先用柱层析富集纯化，降低了后续工序的处理量；

2)采用高速逆流色谱法分离纯化，制备量大，产品纯度高，处理过程中样品无损失。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

以下实施方式采用气相色谱法(参照王燕发表的文献“气相色谱内标法同时测定土木香中土木香内酯、异土木香内酯的含量”)，该文献的条件如下：