[发明专利]一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡及其检测方法

权利要求书

1.一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡，其特征在于：在长条扁平薄壳状的检测卡外壳（1）中设置测试条（2），检测卡外壳表面有检测窗孔（3）和加样孔（4），测试条（2）是由支承背板（5）上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫（8）、胶体金膜（7）、（14）、（15）、硝酸纤维素膜（6）、和吸水膜（9）所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜（6），支承背板一端叠置粘贴吸水膜（9），另一端叠置粘贴样品垫（8），吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体金膜（7）、（14）、（15）；胶体金膜（7）、（14）、（15）依次是含抗格列苯脲抗体、抗格列齐特抗体、抗格列吡嗪抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和一条质控带，依次是：含格列苯脲蛋白质偶联物检测带（10），含格列齐特蛋白质偶联物检测带（11），含格列吡嗪蛋白质偶联物检测带（12），含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带（13）；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

2.权利要求1所述格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡的检测方法，其特征在于应用免疫学的方法直接检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪的含量，检测样品为胶囊、片剂或药丸降糖中药样品，处理方法如下：

（1）随机采集一定量的待测样本，粉碎均匀；

（2）称取5g粉碎后的样品，加入10mL样品抽提液，充分搅拌混合5min以上，震荡反应30min；

抽提液配置如下：在70mL甲醇中加入30mL蒸馏水；

（3）将步骤（2）所得溶液移入10mL离心管，4000r/min离心10min，取离心后的上清液；上清液澄清，按上清液︰样品稀释液为1︰3的比例稀释，即取上清液100μL加入300μL样品稀释液，混合均匀后测定；上清液浑浊，则用滤纸过滤，取过滤后的上清液，按上清液100μL加入300μL样品稀释液进行稀释，混合均匀后测定；

样品稀释液为pH7.6、10mmol PBST溶液；

检测带10、11、12和质控带13同时显现棕红色印迹，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪含量没有超过允许值；

  检测带10、11、12不显示颜色，只有质控带13显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪含量同时超过允许值；

  检测带10、11不显示颜色，检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲和格列齐特含量超过允许值，而格列吡嗪含量没有超过允许值；

 检测带10、12不显示颜色，检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲和格列吡嗪含量超过允许值，而格列齐特含量没有超过允许值；

 检测带11、12不显示颜色，检测带10和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列齐特和格列吡嗪含量超过允许值，而格列苯脲含量没有超过允许值；

检测带10不显示颜色，检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲含量超过允许值，而格列齐特、格列吡嗪含量没有超过允许值；

检测带11不显示颜色，检测带10、12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列齐特含量超过允许值，而格列苯脲、格列吡嗪含量没有超过允许值；

检测带12不显示颜色，检测带10、11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列吡嗪含量超过允许值，而格列苯脲、格列齐特含量没有超过允许值；

检测带10、11、12和质控带13均不显色，则表明测试条失效。