[发明专利]制备醋酸亮丙瑞林的方法、产品及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备醋酸亮丙瑞林的方法，属于医药领域。

背景技术

醋酸亮丙瑞林(Leuprorelin Acetate)，属于原料药，是人工合成的促黄体生成释放激素(LH-RH)的高活性衍生物，广泛用于治疗早熟、子宫内膜异位症、子宫肌瘤或绝经前乳腺癌等女性患者和前列腺癌等男性患者。

目前国内亮丙瑞林粗品的合成多采用Fmoc(芴甲氧羰酰基)保护方法，虽然该方法合成效率较高，反应周期短，但是由于过程中需要采用大量的六氢吡啶、三氟乙酸、乙硫醇和苯酚等毒性非常大的脱保护试剂，对环境污染很大，同时对产品的安全性有较大的风险。

而在亮丙瑞林的纯化过程中，虽然国内基本上都使用C18液相色谱柱层析填料进行纯化，但目前的工艺中多采用三氟乙酸-乙腈-水的缓冲体系进行纯化，该方法收率偏低，同时在产品中带入了三氟乙酸等毒性较大的试剂；同时由于将亮丙瑞林粗品直接进行C18层析，填料的使用寿命非常短。

发明内容

除非另外指出，本文中基团为聚苯乙烯树脂，基团“Boc”为叔丁氧羰酰基，基团“But”为叔丁基；基团“Tos”为对甲苯磺酰基；基团“DCCI”为二环己基碳二亚胺；基团“HOBt”为1-羟基苯骈三唑；基团“iPrOH”为异丙醇，基团“Pro”为脯氨酸，基团“Arg”为精氨酸，基团“Leu”为亮氨酸，基团“Tyr”为酪氨酸，基团“Ser”为丝氨酸，基团“Trp”色氨酸，基团“His”为组氨酸，基团“pGlu”为焦谷氨酸。

本发明的一个目的是提供一种制备醋酸亮丙瑞林的方法，相比现有生产工艺，该方法能够获得更高纯度和收率的醋酸亮丙瑞林。

本发明的另一个目的是提供根据所述方法制备的醋酸亮丙瑞林产品。

本发明的另一个目的是提供所述醋酸亮丙瑞林产品在制备用于治疗早熟、子宫内膜异位症、子宫肌瘤或绝经前乳腺癌等女性患者和/或前列腺癌的药物中的应用。

针对以上发明目的，本发明提供以下技术方案：

一方面，本发明提供一种制备醋酸亮丙瑞林的方法，包括以下步骤：

1)制备Boc-Pro-将Boc-Pro的甲醇溶液，加入到Cs₂CO₃的水溶液中，得到Boc-Pro-Cs溶液，浓缩，蒸去溶剂，得固体物，加入甲醇并减压蒸干，减压干燥至恒重，将得到的Boc-Pro-Cs加入无水DMF(二甲基甲酰胺)溶剂中，加热，待Boc-Pro-Cs溶解后倒入Cl-CH₂-树脂中，搅拌，反应完成后过滤，并洗涤树脂，烘干，真空干燥得Boc-Pro-

2)固相接肽：通过准备原料、接二肽、接三肽、接四肽、接五肽、接六肽、接七肽、接八肽和接九肽的步骤，得到亮丙瑞林九肽树脂，其中，接二肽到接九肽的步骤均包括去保护基、洗涤、中和、再洗涤、接肽和检测游离氨；

3)胺解：通过乙基胺从上述亮丙瑞林九肽树脂上解离亮丙瑞林，得到亮丙瑞林粗品。

4)HPLC纯化：经HPLC制备柱纯化得到醋酸亮丙瑞林中间纯化品；

5)浓缩；

6)过滤、冻干。

进一步，所述步骤1)包括：将质量浓度为15～17％的Boc-Pro的甲醇溶液，加入到质量浓度为15～17％的Cs₂CO₃的水溶液中，得到pH值为7.0～7.5的Boc-Pro-Cs溶液，在40～50℃水浴中减压浓缩，蒸去溶剂，得固体物，加入甲醇并减压蒸干，在以P₂O₅为干燥剂的干燥器内减压干燥至恒重，将得到的干燥的Boc-Pro-Cs加入无水DMF溶剂中，加热至40～50℃，待Boc-Pro-Cs溶解后倒入Cl-CH₂-树脂中，其中，Cl-CH₂-树脂的用量为干燥的Boc-Pro重量的2.5～3倍，40～50℃恒温搅拌反应40～48小时，反应完成后过滤，并洗涤树脂，在45～50℃的烘箱中烘12～16h，在以P₂O₅为干燥剂的干燥器内真空干燥至恒重，得到Boc-Pro-