[发明专利]一种产L-精氨酸的菌株和利用该菌株生产L-精氨酸的方法

权利要求书

1.一种生产L-精氨酸的菌株，该菌株命名黄色短杆菌HX1009，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.4464，该菌株的遗传特性：组氨酸缺陷型His^-，丁二酸缺陷型Suc^-，D-精氨酸抗性D-Arg^r，S-甲基半胱氨酸抗性SMC^r。

2.根据权利要求1所述的菌种，其特征在于以黄色短杆菌ATCC14067为出发菌株，采用亚硝基胍逐级诱变，筛选切断竞争性代谢途径具有组氨酸、丁二酸营养缺陷型菌株的突变株，并具有精氨酸结构类似物抗性、半胱氨酸结构类似物抗性，其D-精氨酸抗性、S-甲基半胱氨酸抗性浓度分别15 mg/mL~25 mg/mL。

3.根据权利要求2所述的菌种，其特征在于筛选所用诱变培养基的组成为：葡萄糖 10~30 g/L，（NH₄)₂SO₄ 3~20 g/L，KH₂PO₄ 2~5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5~1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.02~0.05 g/L，MnSO₄·H₂O 0.02~0.05g/L，琼脂15~20 g/L，生物素1×10^-5~3×10^-5 g/L，硫胺素1×10^-4 ~2×10^-4 g/L，L-组氨酸0.5×10^-2~5×10^-2 g/L，丁二酸0.5×10^-2 ~5×10^-2 g/L，D-精氨酸15×10^-3~25×10^-3 g/L，S-甲基半胱氨酸15×10^-3~25×10^-3 g/L，用双蒸水定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃灭菌20分钟。

4.一种利用权利要求1所述菌株生产L-精氨酸的方法，其特征在于发酵培养基：葡萄糖100~120 g/L，尿素 1 g/L，玉米浆 5~25 g/L，(NH₄)₂SO₄ 30~50 g/L，KH₂PO₄  0.5~2.0 g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.2~1.0 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2~ 0.8 g/L，L-His 0.5~1mg/L，生物素 0.05~ 2mg/L，盐酸硫胺素 0.05~1 mg/L，用双蒸水定容至1L，pH 7.0～7.2；将菌株CGMCC No.4464以W/W 5%~15%接种量转接到发酵培养基中，在通气条件下，以摇瓶培养或搅拌式发酵罐通风培养，控制pH6~8；培养温度28~35℃，发酵罐通风气比v/v 1:0.2 ~ 1:3，培养时间65~100小时。