[发明专利]一种细胞株的筛选方法

权利要求书

1.一种细胞株的筛选方法，包括将轻重链序列转入不同质粒载体，然后转染细胞和利用选择标记进行细胞筛选的步骤，其特征在于，将所述的重链序列插入带有选择标记的筛选基因的载体，将所述的轻链序列插入带有抗性基因的载体上，二者共同转染共扩增基因表达系统细胞，先用抗性培养基筛选阳性克隆，然后进行压力筛选扩增表达。

2.如权利要求1所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述重链序列插入带有DHFR筛选基因的载体，所述轻链序列插入带有Zeocin抗性基因载体。

3.如权利要求1所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述的抗性培养基为含有Zeocin的培养基。

4.如权利要求3所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述的Zeocin筛选浓度为100-400ug/ml。

5.如权利要求3所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述的Zeocin筛选浓度为200-250ug/ml。

6.如权利要求1所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述的表达系统为CHO细胞DHFR扩增系统，通过在转染后的初期，待细胞活性恢复后，先加入Zeocin压力筛选Zeocin抗性的细胞；然后将阳性克隆转入含MTX的筛选培养基进行筛选。

7.如权利要求1-6任一项所述的细胞株的筛选方法，其特征在于，所述的筛选培养基选用含有HT成分的DMEM/F12培养基。