[发明专利]一种用于生物样品中核酸提取纯化的细胞裂解试剂有效
申请号: | 201010621890.X | 申请日: | 2010-12-30 |
公开(公告)号: | CN102533724A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 吴大治;夏懿 | 申请(专利权)人: | 上海复星医学科技发展有限公司;上海复星医药(集团)股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200233*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 生物 样品 核酸 提取 纯化 细胞 裂解 试剂 | ||
1.本发明为一种用于生物样品中核酸提取纯化的细胞裂解试剂,其特征在于,细胞裂解试剂呈碱性并含有胍盐、铵根离子(NH4+)以及表面活性剂,与固相材料组合使用可以提取纯化样品中的核酸。
2.如权利要求1所述,细胞裂解试剂中的胍盐是指但不限于异硫氰酸胍、盐酸胍、肌酸胍、碳酸胍、磷酸胍、硝酸胍;铵根离子来源于氨水或氨气;表面活性剂是指但不限于十二烷基磺酸钠(SDS)、Tween 20、Triton X-100、NP-40、十二烷基肌氨酸钠、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)等。
3.如权利要求1所述,细胞裂解试剂中的胍盐浓度为2-8M,更具体地,优选的胍盐为异硫氰酸胍、盐酸胍,浓度为6M。
4.如权利要求1所述,细胞裂解试剂中的铵根离子浓度为0.1-1M,更具体地,优选的铵根离子浓度为0.5M。
5.如权利要求1和2所述,细胞裂解试剂可以使用上述表面活性剂1-3种的组合,在裂解试剂中的浓度为1-20%,更具体地,细胞裂解试剂中优选的的表面活性剂为SDS和Triton X-100,浓度各为1%和10%。
6.如权利要求1所述,细胞裂解试剂呈碱性,pH值为8-13,更具体地,优选的pH值为9.0。
7.如权利要求1所述,涉及的生物样品包括全血、血清、血浆、唾液、尿液、脑脊液、细胞和组织培养液,或是从人鼻咽部、泌尿生殖道等部位采集的拭子。
8.如权利要求1所述,固相材料是指具有二氧化硅材质的硅胶膜(或玻璃纤维膜)、以及二氧化硅表面修饰的磁性颗粒材料。
9.如权利要求1所述,在细胞裂解试剂中释放的核酸与固相材料结合后,经过洗脱步骤从固相材料上分离获得纯化的核酸。
10.如权利要求1所述,细胞裂解试剂分离纯化的核酸是指样品中的总核酸,包括DNA和RNA。
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