[发明专利]白头翁皂苷类物质在制备抗血吸虫药物中的应用及其该物质的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药、兽药技术领域，涉及一种白头翁皂苷类物质在制备抗血吸虫药物中的应用及其该物质的制备方法，该有效组分具有显著的抗血吸虫活性，可以用于人或其它哺乳动物血吸虫病的预防治疗。

背景技术

白头翁药材取自毛茛科白头翁属植物白头翁(Pulsatilla chinensis(Bunge)Regel)的干燥根，味苦，性寒。归胃、大肠经，具清热解毒，凉血止痢之功。用于热毒血痢，阴痒带下，阿米巴痢。据文献报道，白头翁中含原白头翁素(Protoanemonin)、白头翁素(Anemonin)、白头翁灵(Okinalin，C32H46O2)、白头翁英(Okinalein，C4H6O2)等，近年来国内外学者从白头翁属植物中分离鉴定出几十种五环三萜皂苷成分，这些皂苷主要为齐墩果烷型和羽扇豆烷型两种。白头翁属植物具有广泛的药理及生物活性，主要表现在抗肿瘤、抗炎抗菌、抗病毒、细胞凋亡、抗生物酶、杀虫、杀精等作用。兰继毓等研究发现白头翁煎剂对杀灭溶组织内阿米巴的效果较好。经检索，没有发现白头翁药材及其有效组分具有抗血吸虫活性的文献报道。

经过反复研究发现白头翁水提液及醇提液均具有较强的抗血吸虫活性，经过了系统研究，准备开发以白头翁有效组分为主要成分，用于预防或治疗人或其它哺乳动物血吸虫病的药物。

但白头翁水提液及醇提液作为混合物中混有部分不起作用的物质，需要大剂量使用才有足够的抗血吸虫活性。

将白头翁水提液及醇提液的混合物精制得到单一成分的化合物，有望确保足够的抗血吸虫活性的前提下，减少剂量。而单一成分的抗血吸虫活性化合物和减少剂量是药物产业化中的两个非常重要的因素。

发明内容

本发明提供一种白头翁皂苷类物质在制备抗血吸虫药物中的应用及其该物质的制备方法，该有效组分属于单一成分的化合物，在低剂量的状况下具有显著抗血吸虫活性，可以用于人或其它哺乳动物血吸虫病的预防治疗。

本发明所述的白头翁皂苷类物质是单一成分的化合物，其化学名称为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法为：

第一步、将白头翁药材粉碎成粗粉，用0-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加热回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL，0-4℃冷藏过夜，析胶，滤过，滤液用喷雾干燥法、真空微波干燥法或其它方法进行干燥，收集干浸膏或喷干粉，即得白头翁提取物。

第二步、白头翁提取物用水溶解，经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附，依次用水、35-45％乙醇、95％乙醇洗脱，收集35-45％乙醇洗脱部分。经抗血吸虫药理实验，证明35-45％乙醇洗脱部分为白头翁抗血吸虫有效部位。

第三步、白头翁抗血吸虫有效部位经ODS反相硅胶柱，用甲醇和水(5∶5-10∶0)的混合液进行梯度洗脱，梯度洗脱液依次有五组，其体积配比分别为

第一组甲醇5份∶水5份；

第二组甲醇6份∶水4份；

第三组甲醇7份∶水3份；

第四组甲醇8份∶水2份；

第五组甲醇10份∶水0份；

收集甲醇7份∶水3份的洗脱部分，得到单一成分的化合物，经对照品比较及LC/MS/MS测试，该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

或者第一步、将白头翁药材粉碎成粗粉，用5-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加热回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL，0-4℃冷藏过夜，析胶，滤过，滤液用喷雾干燥法、真空微波干燥法或其它方法进行干燥，收集干浸膏或喷干粉，即得白头翁提取物。其余技术方案类似。