[发明专利]大肠肿瘤的检测方法

权利要求书

1.一种大肠肿瘤有无的判定方法，其特征在于，该方法包括：测定被检细胞中的基因组序列上TWIST1基因的-477～-747区域内的1个或2个以上CpG序列的甲基化程度。

2.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，在判定为具有大肠肿瘤的情况下，进一步判定大肠肿瘤是大肠癌或大肠腺瘤。

3.根据权利要求1或2所述的判定方法，其特征在于，TWIST1基因的-477～-747区域内的1个或2个以上CpG序列是位于序列号1所示核苷酸序列的第57～60位的CGCG序列。

4.根据权利要求3所述的判定方法，其特征在于，测定甲基化程度的方法是结合亚硫酸氢盐的限制性酶分析法，即COBRA法，在扩增位于序列号1所示核苷酸序列的第57～60位的CGCG序列的工序中使用的引物集是序列号4：5’-TGTGTAGAAGTTGTTGTTATT-3’、序列号5：5’-CRAAAAAAACTATCCTAAC-3’的组合。

5.根据权利要求1～4的任一项所述的判定方法，其特征在于，被检细胞是来源于疑似为大肠癌或癌前病变的组织的细胞、大便中所含的细胞、大肠清洗液所含的细胞、血液中所含的细胞或血清所含的细胞。

6.一种大肠肿瘤判定用试剂盒，该试剂盒是测定被检细胞中的基因组序列上TWIST1基因的-477～-747区域内的1个或2个以上CpG序列的甲基化程度的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：用于提取基因组DNA的试剂、用于将非甲基化胞嘧啶转换成尿嘧啶的试剂、用于扩增上述基因组DNA中的TWIST1基因的-477～-747区域内的1个或2个以上CpG序列的引物集、以及用于分析甲基化图谱的试剂。

7.根据权利要求6所述的大肠肿瘤判定用试剂盒，其特征在于，引物集是由序列号4和序列号5所示寡核苷酸组成的引物对。