[发明专利]改善的用于人乳头状瘤病毒的疫苗及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及改善的人乳头状瘤病毒(HPV)疫苗、诱导免疫应答的改善的方法、和针对HPV预防和/或治疗地免疫个体。

背景技术

该申请要求2009年1月23日提交的美国临时申请No.61/146,942、2010年1月21日提交的美国专利申请No.12/691,588的优先权，其公开均通过引用的方式并入本文。

乳头状瘤病毒是小DNA病毒，其包含至多7个早期基因和两个晚期基因。通常，乳头状瘤病毒早期基因表示为E1-E7，并且乳头状瘤病毒晚期基因表示为L1和L2。数个物种的动物可被乳头状瘤病毒家族的成员感染。

人乳头状瘤病毒(HPV)感染是常见的，并且可进行性传播。基于DNA序列的同源性，HPV已经裂化为56或更多的类型。HPV型16和18(其引起上皮异常增生和其他损害)通常和下列情况有关：癌症风险增加，特别是子宫颈、阴道、阴户和肛管的原位和侵入性癌。

DNA疫苗法相对于更加传统的疫苗法具有更多概念上的优点，例如活减毒病毒和重组蛋白-基疫苗。DNA疫苗是安全、稳定、容易生产和在前期临床的人中具有良好忍耐性的，这表明质粒整合的较少证据[Martin，T.，et al.，Plasmid DNA malaria vaccine：the potential for genomic integration after intramuscular injection.Hum Gene Ther，1999.10(5)：p.759-68；Nichols，W.W.，et al.，Potential DNA vaccine integration into host cell genome.Ann N Y Acad Sci，1995.772：p.30-9]。另外，DNA疫苗非常适用于反复施用，因为下列事实疫苗的效果不受到对于载体预存在的抗体滴度的影响[Chattergoon，M.，J.Boyer，and D.B.Weiner，Genetic immunization：a new era in vaccines and immune therapeutics.FASEB J，1997.11(10)：p.753-63]。然而，在移动至较大动物时，临床采用DNA疫苗的一个主要障碍在平台免疫原性中减少[Liu，M.A.and J.B.Ulmer，Human clinical trials of plasmid DNA vaccines.Adv Genet，2005.55：p.25-40]。DNA疫苗免疫原的工程化中的近期技术进展例如密码子优化、RNA优化和免疫球蛋白前导序列的加入已经改善了DNA疫苗的表达和免疫原性[Andre，S.，et al.，Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gp 120 sequence with optimized codon usage.J Virol，1998.72(2)：p.1497-503；Deml，L.，et al.，Multiple effects of codon usage optimization on expression and immunogenicity of DNA candidate vaccines encoding the human immunodeficiency virus type 1 Gag protein.J Virol，2001.75(22)：p.10991-1001；Laddy，D.J.，et al.，Immunogenicity of novel consensus-based DNA vaccines against avian influenza.Vaccine，2007.25(16)：p.2984-9；Frelin，L.，et al.，Codon optimization and mRNA amplification effectively enhances the immunogenicity of the hepatitis C virus nonstructural 3/4A gene.Gene Ther，2004.11(6)：p.522-33]，以及质粒递送系统的近期开发的技术例如电穿孔[Hirao，L.A.，et al.，Intradermal/subcutaneous immunization by electroporation improves plasmid vaccine delivery and potency in pigs and rhesus macaques.Vaccine，2008.26(3)：p.440-8；Luckay，A.，et al.，Effect of plasmid DNA vaccine design and in vivo electroporation on the resulting vaccine-specific immune responses in rhesus macaques.J Virol，2007.81(10)：p.5257-69；Ahlen，G.，et al.，In vivo electroporation enhances the immunogenicity of hepatitis C virus nonstructural 3/4A DNA by increased local DNA uptake，protein expression，inflammation，and infiltration of CD3+T cells.J Immunol，2007.179(7)：p.4741-53]。另外，相比于单独的天然抗原，研究表明共有序列免疫原的使用可能够增加细胞免疫应答的宽度[Yan.，J.，et al.，Enhanced cellular immune responses elicited by an engineered HIV-1 subtype Bconsensus-based envelope DNA vaccine.Mol Ther，2007.15(2)：p.411-21；Rolland，M.，et al.，Reconstruction and function of ancestral center-of-tree human immunodeficiency virus type 1 proteins.J Virol，2007.81(16)：p.8507-14]。