[发明专利]用于放射性标记二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)-葡聚糖的组合物

说明书

发明背景

本公开涉及肿瘤学领域，更具体来说涉及癌症检测剂的放射性标记。

前哨淋巴结活检作为黑素瘤和乳癌诊断的常规程序正快速得到接受(Vera，D.R.等，(2001)J.Nucl.Med.42，951-959)。该技术还未标准化；它典型包括使用^99mTc-胶体和蓝色染料。在胶体成像剂和本发明中使用的放射性同位素^99m锝，具有几种理想的性质：它容易获得、相对低价、成像质量出色并具有6小时的短半衰期。该放射性示踪剂用于在手术前确定前哨淋巴结的位置，然后在手术进行中用于找准前哨淋巴结的解剖位置。通过淋巴管和淋巴结快速清除的蓝色染料，被用于目测证实所选的放射活性淋巴结是前哨淋巴结。因为这种活检程序随着各个从业人员而变，难以用一致的技术规定来训练从业人员，因此这些活检产生了大范围的假阴性报告率(即0至12％，参见Vera，D.R.，同上)。

对这种前哨淋巴结活检技术进行标准化还存在另一个障碍。不存在为前哨淋巴结检测或提取特别设计的蓝色染料或^99mTc-标记试剂。目前，FDA(美国食品药品管理局(U.S.Food and Drug Administration))还未批准任何染料或^99mTc-标记试剂用于前哨淋巴结诊断。因此，下列放射性药剂未按批准用途使用：^99mTc-硫胶体、过滤的^99mTc-硫胶体、^99mTc-三硫化二锑以及几种^99mTc-标记的白蛋白微胶体制剂。(注：胶体是粘性的非定向粒子)。这些药剂都未显示出快速的注射位点清除或高前哨淋巴结提取的理想性质(Hoh，C.K.等，(2003).Nucl.Med.Biol.30，457-464)。

因此，开发被设计用于满足最优前哨淋巴结检测目标(即快速的注射位点清除和低的远距离淋巴结积累)的核成像诊断试剂盒，在乳癌和黑素瘤治疗中是尚未满足的医疗需要。

发明简述

本公开提供了含有与双功能螯合剂例如DTPA偶联的葡聚糖的组合物，其易于用作包含单个冷冻干燥管和液体稀释剂管、在放射性标记后具有高放射化学纯度的“即用型”试剂盒。本公开还提供了长期储存稳定性以及足够的重构稳定性，以便于其药物或临床应用，易于作为诊断成像药剂操作和给药。

在添加^99mTc-高锝酸钠后，本公开显示出双功能配体DTPA的高放射化学纯度(即＞90％的^99mTc-DTPA-葡聚糖纯度)，所述DTPA通过与其5个羧基臂之一的酰胺键偶联到葡聚糖分子上的多个氨基封端的束带上。尽管游离的DTPA无疑使其所有5个去质子化羧基与重金属离子例如¹¹¹铟结合，但作为潜在的八齿配体(还含有三个氮原子，参见H.R.Maecke等，(1989)J.Nucl.Med.30，1235-1239)，七齿DTPA以降低的热力学稳定性结合，这使它对结合⁹⁹Tc离子的竞争更敏感，可能引起放射化学纯度降低。

^99mTc-DTPA-葡聚糖的高放射化学纯度，通过将pH降低到约2至4之间、筛选非竞争性组分并鉴定理想的转移螯合剂甘氨酸(其也用作pH缓冲剂)，以及利用下述事实，得以实现：(1)用于^99mTc的竞争性配体的分布由结合速率常数决定，并且(2)^99mTc从其DTPA-葡聚糖复合物上的解离速率常数非常低并且依赖于pH。因此，通过在高酸性条件下暂时与甘氨酸结合，在通过其稀释剂将该“即用型”试剂盒的pH移向略酸性条件后，甘氨酸将放射性同位素转移到与其结合亲和性更强并持留锝-99m(由于其慢的解离速率常数)的DTPA-葡聚糖，增加了对DTPA-葡聚糖进行放射性标记的高效率。

本公开还提供了磷酸盐缓冲盐水稀释剂，其通过将pH从在注射时引起疼痛的强酸性条件(即约3至4之间的pH)移向更容易忍受的适度酸性条件(即pH＞～5)，能够使患者舒适(M.Stranz和E.S.Kastango(2002)Int.J.Pharm.Compound.6(3)，216-220)。